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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 乳酸的HPLC分析求助
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主
引用回帖:
10楼: Originally posted by 寂寞妖瞳 at 2012-03-01 11:19:30:
那我这个pH=2的磷酸缓冲液到底如何配置哦？1、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠的缓冲体系，以磷酸调pH至适宜。2、磷酸和磷酸氢二钠直接配置。两种方法到底有没有本质上的区别哦。查询分析化学的书，上面也找不到答案。

调pH的方法，滴加磷酸，可用pH计控制。
直接用磷酸和磷酸盐配，你知道加多少量吗？而且称量误差，不能保证每次配置的时候加入的量都完全一样，致使pH有偏差，还是得做用酸碱微调pH。
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守候在风中的宁静。
11楼2012-03-01 11:27:30
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寂寞妖瞳

金虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-03-01 11:27:30:
调pH的方法，滴加磷酸，可用pH计控制。
直接用磷酸和磷酸盐配，你知道加多少量吗？而且称量误差，不能保证每次配置的时候加入的量都完全一样，致使pH有偏差，还是得做用酸碱微调pH。

也就是说，我先配置0.1mol/L磷酸氢二钠和0.1mol/L磷酸二氢钠，这种缓冲溶液的pH为7.21，然后在pH计下用磷酸调节pH等于2，是这样把？
    另外还查询到一个方法是　磷酸盐缓冲液(pH2.0)，甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。不过这个磷酸得用移液管量取了。
      这两种方法都可以吗？还是前者更佳？
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12楼2012-03-01 12:43:35
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主
★ ★
soundhorizo(金币+2): 感谢专业指导 ^^ 欢迎常来 2012-03-01 18:58:50
引用回帖:
12楼: Originally posted by 寂寞妖瞳 at 2012-03-01 12:43:35:
也就是说，我先配置0.1mol/L磷酸氢二钠和0.1mol/L磷酸二氢钠，这种缓冲溶液的pH为7.21，然后在pH计下用磷酸调节pH等于2，是这样把？
    另外还查询到一个方法是　磷酸盐缓冲液(pH2.0)，甲液:取磷酸16.6ml，加水 ...

都可以。
配置0.1mol/L磷酸氢二钠和0.1mol/L磷酸二氢钠，这种缓冲溶液的pH为7.21。——是使用一种盐（氢二或二氢），不是两种哦。


我偏向于第一种，首先，你现在还在摸条件，pH=2只是暂定的，要是以后pH有所调整，譬如pH改为4更加合适。那么第二种方法配制就不行了。应用第一种，在合理的pH范围内，无论pH如何变化，都可以通过磷酸调控。
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守候在风中的宁静。
13楼2012-03-01 12:50:28
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zhrmghgmn

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 寂寞妖瞳 at 2012-03-01 10:50:28:
峰型差不是指拖尾等哦，而是出现双峰，不能分离的双峰，两个峰的大小都差不多，所以很郁闷。谢谢你的回答呢。

现在明确告诉你 乙腈：水（磷酸缓冲液）= 20：80( pH= 2.0)，水就用20mmol/L磷酸氢二钠溶液。
出现双峰的原因可能是样品溶解不完全，用流动相溶解样品比较好。
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14楼2012-03-01 14:15:48
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guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo(金币+1): 感谢应助，欢迎常来分析版指导交流 ^^ 2012-03-01 18:59:21
一直觉得你的乙腈比例太高，给你两个国家标准方法，参考一下
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梦想、激情、灵感、体验--che
15楼2012-03-01 14:36:29
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寂寞妖瞳

金虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by zhrmghgmn at 2012-03-01 14:15:48:
现在明确告诉你 乙腈：水（磷酸缓冲液）= 20：80( pH= 2.0)，水就用20mmol/L磷酸氢二钠溶液。
出现双峰的原因可能是样品溶解不完全，用流动相溶解样品比较好。

水就用20mmol/L磷酸氢二钠溶液，这个pH是达不到2的啊，是要加磷酸调节吗？因为我配置0.1M的磷酸氢二钠pH是9.样品的溶解还蛮好的，因为乳酸和水或者乙腈都是互溶的
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16楼2012-03-01 17:20:05
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你用安捷伦的SB-AQ色谱柱来试试看吧，pH=2的磷酸缓冲液一般应该是用缓冲盐溶液的
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17楼2012-06-11 10:28:09
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

2.0指的是缓冲液的，用有机酸来测没有问题的
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18楼2012-06-27 16:56:39
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~鱼儿

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也在做乳酸检测，按文献上查到的条件，结果出来三个峰。。。。同求高手指点。。。。。
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19楼2013-03-12 10:18:15
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~鱼儿

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我之前用60%乙腈：磷酸缓冲液（pH2.45）测过乳酸，0.7ml/min，C18柱，得到一个峰，但是重复性不好，出峰结果和乳酸的浓度还有关系
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20楼2013-03-12 11:01:21
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