应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 6%变性聚丙烯酰胺凝胶总是凝的不好 求指点 急啊 谢谢了
55/1返回列表
查看: 5114  |  回复: 43
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wskxbxf

新虫 (小有名气)

[交流] 6%变性聚丙烯酰胺凝胶总是凝的不好 求指点 急啊 谢谢了 已有22人参与

最近做AFLP大板 胶用的6%的 总是在梳子的位置凝的不好 6%的工作液是新配的，一般凝固两个小时 求指点啊 是APS的问题？这个有使用期限吗
我的配方如下：
丙烯酰胺       15g
甲叉丙烯酰胺   0.75g
尿素           114g
5xTBE                 50ml
双蒸水          100ml
定容至250ml
每次配胶 每36ml的工作液里，加36微升的TEMED和180微升的10%的APS，
不知道大家都加多少TEMED呢？加大点儿量会不会好凝一点
最近一直困扰 求指点了 谢谢了 不胜感激啊
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-02-29 21:13:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白纸阳光

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by ww1980666 at 2012-03-01 12:01:28
TEMED和APS加大量，多加点没有关系，反正要预电泳的。还有实验室最好开起空调，温度高要凝的快点。本人一直在做大板胶，没有问题。

请问一下预电泳的作用是什么？是不是防止电泳时温度过高导致炸板？
赞一下 回复此楼
41楼2014-05-23 15:00:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 44 个回答

ixido

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小丹木木(金币+1): 很详细哦 2012-03-01 09:56:09
TEMED加大量会加速凝，但是凝的速度过快胶会不匀，影响跑胶的质量。APS一般是现用现配，如果一次配的很多的话，要4度存放，但是也不要超过一个星期。这种东西也不贵，现配最好。
胶不凝的问题，你先试试把梳子洗干净，吹干，再用。梳子带水也会影响梳子附近胶的凝固的。
如果梳子没有问题，那么你在倒胶之前要好好的混匀，剧烈一点都没有关系，一定一定要混匀。
最后还是不行的话，那你需要考虑一下其他试剂的问题了。
赞一下 回复此楼
2楼2012-02-29 22:58:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
APS我一般是一次配好，分装多管，-20度保存，一管用一两周没问题。
赞一下(1人) 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
3楼2012-03-01 00:11:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小丹木木(金币+1): 鼓励交流 2012-03-01 09:56:28
个人习惯：
加大temed和过硫酸铵的用量，使凝胶在半个小时左右凝结最好，
我现在这两样的使用量已经是教科书的两倍，在夏季会加到1.5倍左右
过硫酸铵从来都是现配，从不用过夜的，不管怎么保存；
配个0.5ml-1ml，随便称点，配个浓度，最后以加入量调整

[ Last edited by lzgxgz on 2012-3-1 at 07:33 ]
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-01 07:30:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 44 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭