应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 6%变性聚丙烯酰胺凝胶总是凝的不好 求指点 急啊 谢谢了
53/1返回列表
查看: 5465  |  回复: 43
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wskxbxf

新虫 (小有名气)

[交流] 6%变性聚丙烯酰胺凝胶总是凝的不好 求指点 急啊 谢谢了 已有22人参与

最近做AFLP大板 胶用的6%的 总是在梳子的位置凝的不好 6%的工作液是新配的，一般凝固两个小时 求指点啊 是APS的问题？这个有使用期限吗
我的配方如下：
丙烯酰胺       15g
甲叉丙烯酰胺   0.75g
尿素           114g
5xTBE                 50ml
双蒸水          100ml
定容至250ml
每次配胶 每36ml的工作液里，加36微升的TEMED和180微升的10%的APS，
不知道大家都加多少TEMED呢？加大点儿量会不会好凝一点
最近一直困扰 求指点了 谢谢了 不胜感激啊
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-02-29 21:13:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

装子516

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
ap和temed还是不要加多了，会影响胶，催化过快导致胶太脆，可能是梳子没擦干净，不知道跟室温关系大不大！我们当初在实验室做这个的时候都是前天晚上做好，第二天上午来直接用的！
赞一下 回复此楼
23楼2012-03-01 15:45:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 44 个回答

ixido

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小丹木木(金币+1): 很详细哦 2012-03-01 09:56:09
TEMED加大量会加速凝，但是凝的速度过快胶会不匀，影响跑胶的质量。APS一般是现用现配，如果一次配的很多的话，要4度存放，但是也不要超过一个星期。这种东西也不贵，现配最好。
胶不凝的问题，你先试试把梳子洗干净，吹干，再用。梳子带水也会影响梳子附近胶的凝固的。
如果梳子没有问题，那么你在倒胶之前要好好的混匀，剧烈一点都没有关系，一定一定要混匀。
最后还是不行的话，那你需要考虑一下其他试剂的问题了。
赞一下 回复此楼
2楼2012-02-29 22:58:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
APS我一般是一次配好，分装多管，-20度保存，一管用一两周没问题。
赞一下(1人) 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
3楼2012-03-01 00:11:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小丹木木(金币+1): 鼓励交流 2012-03-01 09:56:28
个人习惯：
加大temed和过硫酸铵的用量，使凝胶在半个小时左右凝结最好，
我现在这两样的使用量已经是教科书的两倍，在夏季会加到1.5倍左右
过硫酸铵从来都是现配，从不用过夜的，不管怎么保存；
配个0.5ml-1ml，随便称点，配个浓度，最后以加入量调整

[ Last edited by lzgxgz on 2012-3-1 at 07:33 ]
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-01 07:30:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 44 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +4 kkcoco25 2026-03-02 7/350 2026-03-02 23:11 by kkcoco25
[基金申请] 成果系统访问量大，请15分钟后再尝试。由此给您造成的不便，敬请谅解。 +7 xhuama 2026-03-02 8/400 2026-03-02 22:33 by taidy
[考研] 267求调剂 +3 钓鱼佬as 2026-03-02 3/150 2026-03-02 22:11 by Elden123
[考研] 求调剂 +3 Guo_yuxuan 2026-03-02 4/200 2026-03-02 21:18 by 无际的草原
[考研] 接收调剂 +6 津萌津萌 2026-03-02 14/700 2026-03-02 20:59 by 汪！？！
[考研] 0856材料求调剂 +12 hyf hyf hyf 2026-02-28 13/650 2026-03-02 20:19 by hypershenger
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +9 吃宵夜1 2026-02-28 11/550 2026-03-02 20:14 by hypershenger
[考研] 材料类考研调剂 +3 gemmgemm 2026-03-01 4/200 2026-03-02 20:02 by hypershenger
[考研] 289求调剂 +8 yang婷 2026-03-02 9/450 2026-03-02 19:08 by zhukairuo
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 15/750 2026-03-02 18:47 by caszguilin
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-03-02 5/250 2026-03-02 18:38 by caszguilin
[考研] 292求调剂 +7 yhk_819 2026-02-28 7/350 2026-03-02 12:43 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +3 熬夜的猫头鹰 2026-03-02 3/150 2026-03-02 11:45 by 刘兵
[基金申请] 此成果不能导入原因：元数据必填信息不完整，可 进行补充。 +4 Kittylucky 2026-03-02 5/250 2026-03-02 11:07 by jurkat.1640
[考研] 284求调剂 +10 天下熯 2026-02-28 11/550 2026-03-02 11:03 by 无际的草原
[考研] 材料类求调剂 +11 wana_kiko 2026-02-28 14/700 2026-03-02 08:46 by 聪明的大松鼠
[考研] 322求调剂 +3 熊境喆 2026-03-01 3/150 2026-03-02 08:44 by houyaoxu
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭