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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 求助：水相分离
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rongxuhaha

金虫 (正式写手)

[求助] 求助：水相分离

我的课题是微生物发酵液的活性成分研究
发酵液首先过了个大孔树脂，取50%甲醇洗脱段进行下一步分离，进行了一步萃取工作，依次用石油醚，氯仿，乙酸乙酯，正丁醇萃取，发现有机萃取相都没有活性，剩余水相有活性，请问水相一般有什么东西，如何进行下一步分离，请有经验的师兄师姐们给予指导。
附：排除有机酸等一些离子化合物，这些东西我已经分完也没活性。TLC分析时一般的显色剂不能让其显色，如硫酸乙醇。
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1楼 2012-02-29 14:38:49
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

fjamigo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-29 17:53:02
rongxuhaha(金币+10): ★★★很有帮助 很有帮助，谢谢 2012-03-01 17:33:30
水相的成分一般很复杂，我做的是植物里面含有很多的皂苷类成分，不知道在微生物这里有没有，下一步的分离建议还是用打孔树脂，可以用不同梯度的乙醇溶液吸附和解析
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2楼2012-02-29 15:09:15
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zhouifang

金虫 (正式写手)
★
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-01 19:49:20
引用回帖:
2楼: Originally posted by fjamigo at 2012-02-29 15:09:15:
水相的成分一般很复杂，我做的是植物里面含有很多的皂苷类成分，不知道在微生物这里有没有，下一步的分离建议还是用打孔树脂，可以用不同梯度的乙醇溶液吸附和解析

同意2楼的，水相重新上大孔树脂，梯度乙醇洗脱，分段检测下看
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天行健
13楼2012-03-01 15:31:08
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普通回帖

rongxuhaha

金虫 (正式写手)
我试过皂苷类的，硫酸乙醇应该显色吧，但是没有啊很头疼
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3楼2012-02-29 15:37:51
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anyluk

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-29 17:53:10
rongxuhaha(金币+3): ★★★很有帮助 多谢！ 2012-03-01 17:36:00
水相一般都是蛋白质，多肽，多糖类，大分子化合物，，
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精益求精
4楼2012-02-29 15:39:47
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1000353

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by anyluk at 2012-02-29 15:39:47:
水相一般都是蛋白质，多肽，多糖类，大分子化合物，，

但是过了大孔树脂大分子化合物不是已经分离除去了吗
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5楼2012-02-29 15:41:44
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1000353

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by anyluk at 2012-02-29 15:39:47:
水相一般都是蛋白质，多肽，多糖类，大分子化合物，，

还有一点 我用过茚三酮显色剂 不显色
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6楼2012-02-29 15:43:09
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anyluk

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-29 17:53:22
引用回帖:
6楼: Originally posted by 1000353 at 2012-02-29 15:43:09:
还有一点 我用过茚三酮显色剂 不显色

茚三酮是检测糖类物质的，多肽呢，多肽是有活性的
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精益求精
7楼2012-02-29 15:54:09
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anyluk

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-29 17:53:35
引用回帖:
7楼: Originally posted by anyluk at 2012-02-29 15:54:09:
茚三酮是检测糖类物质的，多肽呢，多肽是有活性的

是我搞错了，对不起·，，，

可以排除蛋白质，但是多糖呢？
还有
正丁醇萃取后，剩余的溶液，你用甲醇溶解一下，分成甲醇溶，和水溶，在测一下活性，
最后经hplc分析一下，看看有什么物质出峰
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精益求精
8楼2012-02-29 15:59:34
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1000353

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by anyluk at 2012-02-29 15:59:34:
是我搞错了，对不起·，，，

可以排除蛋白质，但是多糖呢？
还有
正丁醇萃取后，剩余的溶液，你用甲醇溶解一下，分成甲醇溶，和水溶，在测一下活性，
最后经hplc分析一下，看看有什么物质出峰

这个我做过还是水溶有活性，什么物质出峰是什么意思？
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9楼2012-02-29 18:52:53
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1000353

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by anyluk at 2012-02-29 15:59:34:
是我搞错了，对不起·，，，

可以排除蛋白质，但是多糖呢？
还有
正丁醇萃取后，剩余的溶液，你用甲醇溶解一下，分成甲醇溶，和水溶，在测一下活性，
最后经hplc分析一下，看看有什么物质出峰

那个多糖不也是大分子吗 过完大孔还会纯在吗？
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10楼2012-02-29 18:54:38
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