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rongxuhaha

金虫 (正式写手)

[求助] 求助:水相分离

我的课题是微生物发酵液的活性成分研究
发酵液首先过了个大孔树脂,取50%甲醇洗脱段进行下一步分离,进行了一步萃取工作,依次用石油醚,氯仿,乙酸乙酯,正丁醇萃取,发现有机萃取相都没有活性,剩余水相有活性,请问水相一般有什么东西,如何进行下一步分离,请有经验的师兄师姐们给予指导。
附:排除有机酸等一些离子化合物,这些东西我已经分完也没活性。TLC分析时一般的显色剂不能让其显色,如硫酸乙醇。
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zhouifang

金虫 (正式写手)


xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-01 19:49:20
引用回帖:
2楼: Originally posted by fjamigo at 2012-02-29 15:09:15:
水相的成分一般很复杂,我做的是植物里面含有很多的皂苷类成分,不知道在微生物这里有没有,下一步的分离建议还是用打孔树脂,可以用不同梯度的乙醇溶液吸附和解析

同意2楼的,水相重新上大孔树脂,梯度乙醇洗脱,分段检测下看
天行健
13楼2012-03-01 15:31:08
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zhouifang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道楼主第一次大孔树脂是怎么跑,跑未知的东西,我们都是从0开始,每10个点一个梯度跑的,然后才分段检测
天行健
15楼2012-03-03 11:01:48
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zhouifang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

水相怎么不能检测,关键是看你的活性物质是什么,然后选择合适的检测方法。至于显色,我觉得跟是不是水相没关系,跟你所用的系统和显色剂有关,当然有一些物质确实不显色,不适合TLC的方法。所以关键是你所要分离的物质是什么。
天行健
17楼2012-04-11 09:07:37
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