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cuckoom

铁虫 (初入文坛)

[求助] 流动相不变,样品浓度不变,溶剂改变,峰面积会改变吗?已有1人参与

今天在做一个药物的标准曲线发现,当我用甲醇作溶剂,乙腈-水(0.2%甲酸)作流动相,10mg/l样品的峰面积大概是1万多,而且此时前边的溶剂峰的响应程度比样品峰的响应程度大,而且前边的溶剂峰竟是开叉的倒峰;接着我重新配了一份溶液,改成用乙腈作溶剂,流动相,流速,样品浓度不变,但此时峰面积高达20多万,前边溶剂峰却正常,响应远比样品的响应程度小,也没有开叉的倒峰,样品出峰时间稍微有提着点但变化不是很大;这时我又再重新测了一下之前用甲醇做溶剂的那个样品,这时前面的溶剂峰还是开叉的倒峰,但样品的峰面积却也变成20多万而且数值还比用乙腈作溶剂测得的大些,怎么会出现这些现象呢,我应该选什么作溶剂好呢?我所做的这个样品已指明能溶于甲醇但却没说是否能溶于乙腈。这里请教各位,先谢谢了!
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liuwei10987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
溶剂效应的其中一个现象,甲醇的极性大于乙腈,反相固定相非极性较强,那么极性大的物质就很容易被冲了出来,而你的样品易溶于甲醇,就会有部分样品直接随溶剂甲醇出来,其实前后响应值高的峰都是你的样品峰。

溶剂效应会导致峰前延、拖尾、分叉,保留时间变化。
为了减弱溶剂效应,需要提前做好预实验,包括溶剂的选择、样品浓度、上样量、紫外波长的选择等。
12楼2012-02-27 18:31:58
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