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daiwei1229

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC色谱峰宽、不对称、拖尾怎么办

我做的是一种酸性药物的色谱分析,查文献的色谱条件是:
柱温:30℃
流速:1
流动相:乙腈:乙酸盐缓冲液(pH4.0)(11::89)
色谱柱:C18(150*4.6)
进样量:20μL
波长:268
按此条件做出来的峰形很不好,不对称,峰比较宽,而且拖尾,而且峰面积和浓度不成比例。望各位大侠给些意见改进一下


[ Last edited by daiwei1229 on 2012-2-23 at 13:47 ]
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豆哥

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-23 21:15:23
daiwei1229(金币+1): ★★★很有帮助 2012-02-24 17:01:01
1. 可能是柱效不好,换根柱子试试看
2. 加三乙胺,或者调节流动相酸碱度
3. 继续纯化样品
4. 减少进样量
边学边问,才有学问。
3楼2012-02-23 14:44:18
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anyluk

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国家高级公共营养师

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-23 21:15:17
daiwei1229(金币+1): 有帮助 2012-02-24 17:00:32
换根柱子,再做一次
精益求精
2楼2012-02-23 14:04:43
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-23 21:15:35
daiwei1229(金币+1): 有帮助 2012-02-24 17:01:20
同意三楼,方法都可行。另外可以试试提高一下柱温40℃,试试看。
守候在风中的宁静。
4楼2012-02-23 16:11:40
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daiwei1229

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-02-23 16:11:40:
同意三楼,方法都可行。另外可以试试提高一下柱温40℃,试试看。

文献温度是25,我已经提高了5℃了
5楼2012-02-24 17:02:03
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