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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » HPLC色谱峰宽、不对称、拖尾怎么办
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daiwei1229

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC色谱峰宽、不对称、拖尾怎么办

我做的是一种酸性药物的色谱分析，查文献的色谱条件是：
柱温：30℃
流速：1
流动相：乙腈：乙酸盐缓冲液（pH4.0）（11：:89）
色谱柱：C18（150*4.6）
进样量：20μL
波长：268
按此条件做出来的峰形很不好，不对称，峰比较宽，而且拖尾，而且峰面积和浓度不成比例。望各位大侠给些意见改进一下


[ Last edited by daiwei1229 on 2012-2-23 at 13:47 ]
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1楼2012-02-23 13:44:30
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永恒国度

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 豆哥 at 2012-02-25 10:03:01:
三乙胺就是扫尾剂
一般用量在浓度为0.3%-0.5%，不宜过多。

这可不是过硅胶柱，反相上0.01%的三乙胺pH已经接近11了，普通C18上用0.3%-0.5%，柱子很快就挂了，反相上用碱性条件可得小心了
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15楼2012-04-02 19:46:35
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永恒国度

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主的色谱峰其实还可以的啊 没有看出明显的不对称，你有没有在仪器上读出对称因子是多少？光眼睛看是不准的 你这个峰 峰宽在一分钟还可以的 你要是整张图的时间是30分钟 那这个峰看起来肯定是不怎么胖的了。 有点小拖尾的话，因为你是分析酸性物质 有可能pH 4.0还不大够 可以尝试再调低点pH试试看 2~3之间 一般的酸性化合物就都能是中性分子状态了
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2012-04-02 19:54:02
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