应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 天然生物材料 » 提高DNA连接效率操作问题
202/2返回列表上一页12
查看: 3317  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

blairJing

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
9楼: Originally posted by hcswj at 2012-02-26 21:31:05:
我曾经用氨基DNA接羧基磁珠，也是死都接不上去，不管是自己合成修饰的磁珠还是买的磁珠都不行。后来我用羧基DNA接氨基磁珠就接上去了，至今没找到原因。

你用羧基DNA连接氨基磁珠也用EDC/NHS活化了吗？我这边有人做磁珠，说氨基磁珠非特异性吸附比较强啊@！
赞一下 回复此楼
11楼2012-03-20 16:42:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blairJing

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
水墨丹青: 金币+2, ★有帮助, 不好意思，才看到这是应助回帖，寥寥金币，感谢你的回复~ 2012-05-20 19:59:51
你是做分子信标吗？你那个介孔硅表面有可能空间位阻大吧，是FAM在介孔硅上还是DNA在介孔硅上啊，我也做分子信标，讨论一下啊
赞一下 回复此楼
12楼2012-03-20 16:52:24
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duruo

荣誉版主 (文坛精英)

孩儿她爹

优秀超版优秀版主优秀区长

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2012-03-24 14:32:58
水墨丹青: 金币+2, ★有帮助, 呵呵~多谢多谢！ 2012-05-20 19:58:31
建议你在微酸环境下用EDC/NHS活化羧基
然后在微碱条件下，用氨基取代
赞一下 回复此楼
能攻心则反侧自消，从古知兵非好战；不审势即宽严皆误，后来治蜀要深思
13楼2012-03-24 13:55:45
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

magic6

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hcswj at 2012-02-26 21:31:05:
我曾经用氨基DNA接羧基磁珠，也是死都接不上去，不管是自己合成修饰的磁珠还是买的磁珠都不行。后来我用羧基DNA接氨基磁珠就接上去了，至今没找到原因。

用羧基DNA的话岂不是要活化DNA？这样操作会不会比较麻烦？
请问您连接的时候DNA和磁珠的用量比例是怎么确定的呢？
还有如何确证DNA已经连接到磁珠上了？
赞一下 回复此楼
14楼2012-03-27 15:34:18
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水墨丹青

木虫 (小有名气)
呵呵、、欢迎围观~
赞一下 回复此楼
15楼2012-04-30 13:03:11
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水墨丹青

木虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by blairJing at 2012-03-20 16:52:24:
你是做分子信标吗？你那个介孔硅表面有可能空间位阻大吧，是FAM在介孔硅上还是DNA在介孔硅上啊，我也做分子信标，讨论一下啊

不是，我是做的aptamer，跟分子信标差不多啦~不过我现在aptamer接上去了，你的如何呢？
不过空间位阻应该不存在吧？我的表面除了修饰羧基基团没有别的啊，如果是因为羧基太多那应该更容易接上去不是。
赞一下 回复此楼
16楼2012-04-30 13:06:59
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水墨丹青

木虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by duruo at 2012-03-24 13:55:45:
建议你在微酸环境下用EDC/NHS活化羧基
然后在微碱条件下，用氨基取代

亲，我现在接上去了，直接pH=5.0，活化完了还是5.0buffer里面过夜，就接上去了
赞一下 回复此楼
17楼2012-04-30 13:07:56
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duruo

荣誉版主 (文坛精英)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 水墨丹青 at 2012-04-30 13:07:56:
亲，我现在接上去了，直接pH=5.0，活化完了还是5.0buffer里面过夜，就接上去了

恭喜

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
18楼2012-04-30 17:06:36
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

csbcook

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hcswj at 2012-02-26 21:31:05
我曾经用氨基DNA接羧基磁珠，也是死都接不上去，不管是自己合成修饰的磁珠还是买的磁珠都不行。后来我用羧基DNA接氨基磁珠就接上去了，至今没找到原因。

我也是啊，死活接不上，现在干脆不用了
赞一下 回复此楼
19楼2012-09-21 09:35:38
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shanxiaoyue

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hcswj at 2012-02-26 21:31:05
我曾经用氨基DNA接羧基磁珠，也是死都接不上去，不管是自己合成修饰的磁珠还是买的磁珠都不行。后来我用羧基DNA接氨基磁珠就接上去了，至今没找到原因。

同问：怎么知道已经接上去了呢？
赞一下 回复此楼
20楼2013-06-04 21:07:22
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 水墨丹青 的主题更新
202/2返回列表上一页12
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 4/200 2026-08-04 04:54 by k7OM8YghWbkC
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 7/350 2026-08-04 04:50 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 6/300 2026-08-04 04:47 by k7OM8YghWbkC
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 04:47 by k7OM8YghWbkC
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 5/250 2026-08-04 04:44 by k7OM8YghWbkC
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 04:41 by k7OM8YghWbkC
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 9/450 2026-08-04 03:56 by kf2781974
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 7/350 2026-08-04 03:35 by k7OM8YghWbkC
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 12/600 2026-08-04 03:17 by k7OM8YghWbkC
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +19 低垂的野花 2026-07-31 25/1250 2026-08-03 09:25 by gy116024
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[教师之家] 基础研究怎么拉横向，学校到款任务越来越多，难以完成 拉横向，都有哪些途径啊 +8 锦衣卫寒战 2026-07-28 12/600 2026-08-03 08:22 by syl200707
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 系统今天又提示维护了，估计离放榜不远了 +11 winnerche 2026-07-29 15/750 2026-07-30 23:08 by jnhyjjm
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭