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blairJing

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
9楼: Originally posted by hcswj at 2012-02-26 21:31:05:
我曾经用氨基DNA接羧基磁珠,也是死都接不上去,不管是自己合成修饰的磁珠还是买的磁珠都不行。后来我用羧基DNA接氨基磁珠就接上去了,至今没找到原因。

你用羧基DNA连接氨基磁珠也用EDC/NHS活化了吗?我这边有人做磁珠,说氨基磁珠非特异性吸附比较强啊@!
11楼2012-03-20 16:42:55
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blairJing

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
水墨丹青: 金币+2, 有帮助, 不好意思,才看到这是应助回帖,寥寥金币,感谢你的回复~ 2012-05-20 19:59:51
你是做分子信标吗?你那个介孔硅表面有可能空间位阻大吧,是FAM在介孔硅上还是DNA在介孔硅上啊,我也做分子信标,讨论一下啊
12楼2012-03-20 16:52:24
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duruo

荣誉版主 (文坛精英)

孩儿她爹

优秀超版优秀版主优秀区长

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2012-03-24 14:32:58
水墨丹青: 金币+2, 有帮助, 呵呵~多谢多谢! 2012-05-20 19:58:31
建议你在微酸环境下用EDC/NHS活化羧基
然后在微碱条件下,用氨基取代
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
13楼2012-03-24 13:55:45
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magic6

金虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by hcswj at 2012-02-26 21:31:05:
我曾经用氨基DNA接羧基磁珠,也是死都接不上去,不管是自己合成修饰的磁珠还是买的磁珠都不行。后来我用羧基DNA接氨基磁珠就接上去了,至今没找到原因。

用羧基DNA的话岂不是要活化DNA?这样操作会不会比较麻烦?
请问您连接的时候DNA和磁珠的用量比例是怎么确定的呢?
还有如何确证DNA已经连接到磁珠上了?
14楼2012-03-27 15:34:18
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水墨丹青

木虫 (小有名气)

呵呵、、欢迎围观~
15楼2012-04-30 13:03:11
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水墨丹青

木虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by blairJing at 2012-03-20 16:52:24:
你是做分子信标吗?你那个介孔硅表面有可能空间位阻大吧,是FAM在介孔硅上还是DNA在介孔硅上啊,我也做分子信标,讨论一下啊

不是,我是做的aptamer,跟分子信标差不多啦~不过我现在aptamer接上去了,你的如何呢?
不过空间位阻应该不存在吧?我的表面除了修饰羧基基团没有别的啊,如果是因为羧基太多那应该更容易接上去不是。
16楼2012-04-30 13:06:59
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水墨丹青

木虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by duruo at 2012-03-24 13:55:45:
建议你在微酸环境下用EDC/NHS活化羧基
然后在微碱条件下,用氨基取代

亲,我现在接上去了,直接pH=5.0,活化完了还是5.0buffer里面过夜,就接上去了
17楼2012-04-30 13:07:56
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duruo

荣誉版主 (文坛精英)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 水墨丹青 at 2012-04-30 13:07:56:
亲,我现在接上去了,直接pH=5.0,活化完了还是5.0buffer里面过夜,就接上去了

恭喜

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
18楼2012-04-30 17:06:36
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csbcook

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by hcswj at 2012-02-26 21:31:05
我曾经用氨基DNA接羧基磁珠,也是死都接不上去,不管是自己合成修饰的磁珠还是买的磁珠都不行。后来我用羧基DNA接氨基磁珠就接上去了,至今没找到原因。

我也是啊,死活接不上,现在干脆不用了
19楼2012-09-21 09:35:38
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shanxiaoyue

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by hcswj at 2012-02-26 21:31:05
我曾经用氨基DNA接羧基磁珠,也是死都接不上去,不管是自己合成修饰的磁珠还是买的磁珠都不行。后来我用羧基DNA接氨基磁珠就接上去了,至今没找到原因。

同问:怎么知道已经接上去了呢?
20楼2013-06-04 21:07:22
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