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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 天然生物材料 » 提高DNA连接效率操作问题
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水墨丹青

木虫 (小有名气)

[求助] 提高DNA连接效率操作问题

之前做过ＤＮＡ的连接，用的是ＥＤＣ－ＮＨＳ体系，但是老是接不上去。所以想想各位请教请教~
我用的ＥＤＣ和ＮＨＳ的水溶液体系。体系的ＰＨ没有特意调，先加的ＥＤＣ，15min活化后加的ＮＨＳ，但是接完后计算连接效率才发现完全没有接上去，不知道各位能不能帮忙找找有什么问题。
如果有其他的高效率连接ＤＮＡ的连接方法，也还请大家多多指教。
以上~~
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1楼 2012-02-22 11:34:33
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duruo

荣誉版主 (文坛精英)

孩儿她爹

优秀超版优秀版主优秀区长

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2012-03-24 14:32:58
水墨丹青: 金币+2, ★有帮助, 呵呵~多谢多谢！ 2012-05-20 19:58:31
建议你在微酸环境下用EDC/NHS活化羧基
然后在微碱条件下，用氨基取代
赞一下 回复此楼
能攻心则反侧自消，从古知兵非好战；不审势即宽严皆误，后来治蜀要深思
13楼2012-03-24 13:55:45
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772968930

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
水墨丹青(金币+2): ★有帮助 呵呵。。好啊~posuidezhi@gmail.com或者1097429205@qq.com，还请你发到我的邮箱咯~~谢谢啦！ 2012-02-25 00:35:02
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-02-25 08:54:02
我也在感叹啊，文献上的不可信啊
不过我可以给你点文献，你试一试
赞一下 回复此楼
一心向着太阳
2楼2012-02-22 12:44:31
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hcswj

木虫 (小有名气)
你的DNA带什么基团？连接到什么基质上？
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启程
3楼2012-02-23 10:30:57
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hcswj

木虫 (小有名气)
还有你用的什么方法验证没有接上？
赞一下 回复此楼
启程
4楼2012-02-23 10:35:36
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