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panpan3209

金虫 (小有名气)

[求助] 抗体非特异性结合

类似ELISA法,通过二抗与抗体的结合检测溶液中物质,二抗吸附于NC膜上。但发现抗体与另一谱带的亲和素类蛋白物质发生非特异性结合,溶液中BSA、吐温均含少量,但非特异性结合仍存在。请问各位大侠,如何能减弱其非特异性结合?最好是在不影响特异性目的结合的条件下。因还需给出较好的检测信号值。
非常感谢!!!

[ Last edited by panpan3209 on 2012-2-22 at 09:36 ]
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aquemarine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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panpan3209(金币+3): 2012-02-23 08:49:08
"亲合素又称卵白蛋白或抗生物素,分子量为68000,pI 10~10.5;亲和素的高pI及高含糖结构导致在聚苯乙烯板和硝酸纤维素膜上或与组织细胞DNA结合时,易产生一定程度的非特异性结合,造成较高的显色背景;链霉亲和素等电点更接近中性(pI=5~6),且不含糖基侧链,链亲和素在应用中明显克服了亲和素的这一缺点."
(引自网络)
你用的是亲和素还是链霉亲和素呢?
守候健康 等待平安归来!
7楼2012-02-22 21:10:34
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