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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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颗粒子

铁虫 (正式写手)

[交流] cDNA为模板扩出来条带很不理想,why。。。 已有2人参与

提RNA提了很多次,反转录做了很多次;老是提的含量不高,后来终于提到质量比较好的了,反转录出来的cDNA要么扩不出来基因,要么条带很淡很淡。。唉,今天又是个不理想的结果……到底是试剂的问题还是我的原因啊??
哪个程序出问题了?
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想要棒棒糖一样美美的日子~
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quiller2000

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
longwave(金币+1): 谢谢参与! 2012-02-22 01:14:06
tuobaohua(金币+1): 生化高手啊! 2012-02-22 07:58:10
1,你要有对照来评价你的total RNA, cDNA
2, 在你分离RNA的状态下,你的目的基因的表达丰度
3,不同mRNA的反转录效率差别很大很大~~~~~~
4,考虑用目的基因的引物做RT,这样可以增加一下模板
5,考虑你的PCR条件!

Good luck!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

致良知
2楼2012-02-21 22:39:29
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颗粒子

铁虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by quiller2000 at 2012-02-21 22:39:29:
1,你要有对照来评价你的total RNA, cDNA
2, 在你分离RNA的状态下,你的目的基因的表达丰度
3,不同mRNA的反转录效率差别很大很大~~~~~~
4,考虑用目的基因的引物做RT,这样可以增加一下模板
5,考虑你的PCR ...

膜拜,真真高手!
想要棒棒糖一样美美的日子~
3楼2012-02-22 15:20:34
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永远不知道

至尊木虫 (著名写手)

金花家族创始人

同感同感
4楼2012-03-02 18:25:36
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