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颗粒子

铁虫 (正式写手)

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[交流] cDNA为模板扩出来条带很不理想，why。。。已有2人参与

提RNA提了很多次，反转录做了很多次；老是提的含量不高，后来终于提到质量比较好的了，反转录出来的cDNA要么扩不出来基因，要么条带很淡很淡。。唉，今天又是个不理想的结果……到底是试剂的问题还是我的原因啊？？
哪个程序出问题了？

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想要棒棒糖一样美美的日子~

1楼 2012-02-21 22:01:31

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quiller2000

木虫 (著名写手)

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★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
longwave(金币+1): 谢谢参与！ 2012-02-22 01:14:06
tuobaohua(金币+1): 生化高手啊！ 2012-02-22 07:58:10

1，你要有对照来评价你的total RNA, cDNA
2，在你分离RNA的状态下，你的目的基因的表达丰度
3，不同mRNA的反转录效率差别很大很大~~~~~~
4，考虑用目的基因的引物做RT，这样可以增加一下模板
5，考虑你的PCR条件！

Good luck!

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颗粒子

致良知

2楼2012-02-21 22:39:29

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颗粒子

铁虫 (正式写手)

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楼: Originally posted by quiller2000 at 2012-02-21 22:39:29:
1，你要有对照来评价你的total RNA, cDNA
2，在你分离RNA的状态下，你的目的基因的表达丰度
3，不同mRNA的反转录效率差别很大很大~~~~~~
4，考虑用目的基因的引物做RT，这样可以增加一下模板
5，考虑你的PCR ...

膜拜，真真高手！

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想要棒棒糖一样美美的日子~

3楼2012-02-22 15:20:34

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