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weili100

新虫 (小有名气)

[求助] DNA合成单如何解读?请教!

图片给出了DNA合成单:
想了解ug per OD 和 nmols per OD 的量是怎么计算的?
  DNA修饰后还能不能用260nm波长的吸光度进行DNA的定量的分析?修饰后的基团如果在该区域没有是不是就可以。浓度怎么计算?
请教高手!!!

DNA 合成单



[ Last edited by weili100 on 2012-2-21 at 10:10 ]
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nkhwrb

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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西湖醉鱼(金币+1): 感谢来分析版指导 2012-02-21 20:05:29
LZ去看生工的手册,上面讲得非常清楚。

管它修饰后吸光怎么变化,不影响你用这个报告单计算DNA的量。
2楼2012-02-21 17:33:40
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weili100

新虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by nkhwrb at 2012-02-21 17:33:40:
LZ去看生工的手册,上面讲得非常清楚。

管它修饰后吸光怎么变化,不影响你用这个报告单计算DNA的量。

需要用UV-VIS进行定量的
3楼2012-02-21 18:50:01
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liubing7100

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
weili100(金币+3): 有帮助 2012-02-25 13:22:15
用紫外分光光度计在260nm波长测定溶液的吸光度来定量,请注意紫外分光光度计的使用,测定时溶液的吸光度最好稀释到0.2-0.8之间(吸光度太高或太低会有较大的误差)。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后,取部分溶液稀释到1ml并在1ml标准比色皿中测定其吸光度,即为所测体积的OD值,进而可以计算出母液的OD值。
举例:您拿到一管干粉的DNA,用1ml水溶解成母液,取该母液50μL稀释成1ml并在1ml标准比色杯中测定的吸光度为0.25,说明该50μL中含有0.25OD的DNA,也即说明原来1ml母液中含有5OD的DNA
你说的ug per OD 和 nmols per OD 的量计算,用(8.4nmol/1000)*4500.90就是了。
OD值是测出来的,不同的DNA分子量不同,好像纯粹理论计算搞不出来。对于你的第二个问题:260nm是所有DNA的共有的吸收峰,修饰以后还能不能在这个波长下作检测,很难说的。修饰后有影响肯定不行,没有影响的话应该还可以,但是要考虑仔细了,我以前用DNA修饰纳米粒子作解链温度。
偷窥上帝的房间
4楼2012-02-24 11:39:10
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