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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » MTT法求助--药物溶解问题
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刘蓓蓓

金虫 (正式写手)

[求助] MTT法求助--药物溶解问题

大家好，我现在在做药物活性筛选，问题是我的单体化合物是皂苷四环三萜化合物，现在问题是，溶解不了，稀释很多倍仍然可以看到小颗粒，我也尝试先用DMSO溶解，但是一但用PBS稀释就又析出，根本溶解不了，请问有什么好的方法可以溶解药物，乙醇和DMSO最大浓度可以用到多少？
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1楼 2012-02-19 10:37:54
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

rosexie_2004

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
leecius(金币+1): 谢谢帮助。 2012-02-20 09:05:23
刘蓓蓓(金币+1): ★有帮助 2012-02-20 11:20:47
DMSO的浓度一般在1%以下，不能太高。
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4楼2012-02-20 08:32:16
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zhongyun8668

铜虫 (初入文坛)
看标题，您是想做MTT法检测细胞水平的增殖抑制活性筛选么？
你定的化合物筛选浓度是多少？通常来讲，细胞水平的筛选，是以化合物筛选的最高浓度的至少100倍或更高倍数用100%的DMSO来配制母液的，比如你筛选的最高浓度是10uM，那配制的母液浓度至少也要在10mM以上，越高越好。因为这样才能保证DMSO的终浓度均在1%以下。
你说的0.6mg的样品，用4Ml 溶解都溶解不了，是指用100%的DMSO还是别的溶媒？
如果你的化合物在PH7.4中的溶解度能达到100ug/ml的话，那已经算是高溶解度的了。
只是在往后的PK，PD实验中如果要采用静脉给药的话，会碰到点问题。
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花开花落自有时
7楼2012-07-24 11:49:16
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普通回帖

爱因斯坦2

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-19 18:03:47
刘蓓蓓(金币+1): ★有帮助 2012-02-20 11:20:34
如果是一定，非要用PBS的话是有一点困难。我个人认为有两条路线，一是做结构的修饰来提高你这个化合物的极性，或者想方设法来降低试剂的极性以适应你这个化合物的极性。
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亲爱的---我是正宗的90后哦
2楼2012-02-19 11:27:07
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cddryw

铁虫 (正式写手)
leecius(金币+1): 谢谢参与。 2012-02-20 09:05:16
你样品的量多少？用多少DMSO溶解？
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刘蓓蓓
梅花精神
3楼2012-02-19 15:36:44
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刘蓓蓓

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by cddryw at 2012-02-19 15:36:44:
你样品的量多少？用多少DMSO溶解？

我都知用了0.6mg的样品，用4Ml 溶解都溶解不了呀？
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5楼2012-02-20 11:20:01
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ylcui

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
刘蓓蓓(金币+2): ★★★很有帮助 2012-02-22 22:24:40
刘蓓蓓(金币+1): ★★★很有帮助 2012-02-22 22:25:08
用DMSO溶解配成母液，直接稀释到含血清的培养基中，现用现加会好些。注意DMSO终浓度一般低于五百分之一，最高也不能超过百分之一。对照组和空白组也得加同样量的DMSO，否则DMSO对细胞膜的促透作用，会影响评价。
如果是单体或近似单体，尽量用摩尔浓度，有利于成果发表。
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6楼2012-02-20 13:22:49
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食品科学2012

铜虫 (小有名气)
用DMSO不能溶解，不妨用甲醇或者氯仿等有机溶剂进行溶解，但是要记录好所用溶剂的比例，为了加药时做空白对照用！我们实验室一直在用！
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8楼2012-11-26 13:11:27
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倪言

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by rosexie_2004 at 2012-02-20 08:32:16
DMSO的浓度一般在1%以下，不能太高。

我想知道，1%的浓度是怎么配的，一般我是直接用的分析纯，我也不知道分析纯的浓度是多少啊？
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爱生活爱自己
9楼2013-08-30 13:55:50
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生姜大哥

木虫 (正式写手)
我之前也遇到DMSO的问题，查了很多文献资料，比较权威的说法是0.1% DMSO是不影响的，先用DMSO溶，然后直接用培养基稀释到你需要的测试浓度后加入96孔板，如果用pbs的话，pbs加入的两也不能太多啊，这样也不是很好
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10楼2013-08-30 14:05:52
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