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summerinsect

木虫 (著名写手)

[求助] 测序无信号

PCR产物经过回收纯化,琼脂糖凝胶电泳检测,发现条带很亮,但送去测序却说没有信号。请教各位高手,是哪里出错了?应该怎么继续啊?
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wiln1

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励积极应助! 2012-02-14 19:58:11
summerinsect(金币+5): ★★★很有帮助 谢谢你这么快就回复我! 2012-02-15 09:29:00
自带引物?送的引物是1个还是1对?如果是1对测序公司都试过吗?如果他们只是用其中1个或你只送了1个引物用来测序,那你的PCR产物可能是单引物扩增得到的。可以用另一个引物试试。我觉得你最好是连接到PMD-18载体上,转化到大肠杆菌中再去测序。
2楼2012-02-14 16:30:50
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summerinsect

木虫 (著名写手)

引用回帖:
楼: Originally posted by wiln1 at 2012-02-14 16:30:50:
自带引物?送的引物是1个还是1对?如果是1对测序公司都试过吗?如果他们只是用其中1个或你只送了1个引物用来测序,那你的PCR产物可能是单引物扩增得到的。可以用另一个引物试试。我觉得你最好是连接到PMD-18载体上 ...

我准备再送一次样品,如果还是测不出来,就只能连载体了。
3楼2012-02-15 09:30:19
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