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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » primer 5 设计引物的问题
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匿名

用户注销 (正式写手)
西瓜(金币+1): 鼓励 2012-02-12 23:59:29
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11楼2012-02-12 23:03:28
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cxl_yll

木虫 (正式写手)
小丹木木(金币+2): 很热心哦 2012-02-13 09:11:24
引用回帖:
3楼: Originally posted by cxl_yll at 2012-02-12 19:32:42:
以200bp设计引物就可以了，如何需要加酶切位点，根据实验需要记得加保护碱基哦~~ 妹妹 你是哪个学校啊

我看了你的图了，你设计引物是从93开始到216结束，因为你本身是根据100bp设计的，所以你扩出来的就是100bp.你可以花1个小时看看分子克隆那本书关于PCR原理的就明白了，你实验室也莫有人带你么？我Q37708925
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12楼2012-02-13 07:53:11
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fwks3518

木虫 (正式写手)

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小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-02-13 09:10:45
杜拉拉314159(金币+1): 2012-02-16 09:15:21
你的primer5没设置好，点search的时候，把产物序列长度改一下，比如改到100-300bp，这样最后你就会得到需要的序列了。
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13楼2012-02-13 08:58:43
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

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小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-02-15 11:12:20
杜拉拉314159(金币+1): 2012-02-16 09:16:20
这个用200bp设计肯定是可以的，在两端就可以，下载的软件应该有使用说明的，如果你的没有，可以在网上下载一个。确实手动设计的比较好，自动生成的不一定是最好的，呵呵。看懂了其实挺简单的，相信自己
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14楼2012-02-13 19:27:13
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钟心碧

金虫 (小有名气)

心碧
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灵魂是否存在
15楼2012-02-15 10:01:03
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杜拉拉314159

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2012-02-12 23:03:28:
手动设计，直接在你目的序列两段选择合适长度，然后用Oligo评价一下，或者用PP5设计的时候设置一下上下游引物的范围，就行了。

这两天做实验，回复晚了，不好意思哈，谢谢你的建议~！
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自己选择的路，跪着也要走完！
16楼2012-02-16 09:09:36
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杜拉拉314159

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by piaoyunokok at 2012-02-13 19:27:13:
这个用200bp设计肯定是可以的，在两端就可以，下载的软件应该有使用说明的，如果你的没有，可以在网上下载一个。确实手动设计的比较好，自动生成的不一定是最好的，呵呵。看懂了其实挺简单的，相信自己

谢谢你的回复哈，我再试试看，嘿嘿~！
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自己选择的路，跪着也要走完！
17楼2012-02-16 09:16:38
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