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介孔硅胶纳米粒的激光共聚焦实验问题
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如题，在做介孔硅胶纳米粒的激光共聚焦实验上遇到了几个问题： 1，纳米粒聚集现象比较严重，是否有较好的解决方法？ 2，纳米粒无法进入细胞，推测是聚集现象导致的或者是因为孵育的时间不够长？（因此想问问做过的人士，孵育多久合适？） 3，结果看上去纳米粒并没有进入细胞，但是却没被PBS洗掉，请教各位大牛如何彻底地清洗残留在细胞膜上的纳米粒。  不知道清不清楚，大概就是这样的。。  [ Last edited by 188283828 on 2012-2-11 at 21:57 ] |
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7楼2012-02-13 11:08:28
liuanan
专家顾问 (著名写手)
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专家经验: +61 - BM-EPI: 1
- 应助: 147 (高中生)
- 贵宾: 0.03
- 金币: 9006.5
- 帖子: 1279
- 在线: 653.1小时
- 虫号: 313642
2楼2012-02-11 14:35:49
3楼2012-02-11 16:10:39
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
188283828(金币+5): 很多思想就是我正在做的...非常感谢 2012-02-11 21:53:36
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-02-11 22:51:08
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
188283828(金币+5): 很多思想就是我正在做的...非常感谢 2012-02-11 21:53:36
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-02-11 22:51:08
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我觉得你的这个不能说在细胞膜上 或者说 没有进入细胞 蓝色细胞核纳米粒子一般式进入不了的 细胞核周围的还是有绿色的 反而可以说明可能进入细胞 你细胞的浓度太高，做这个细胞浓度低比较好，最好一个视野只有几个，细胞不要聚集，这样在白光视野下你可以方便看出细胞的边界。也就是说可以还叠加一个白光的视野。 孵育的时间 一般也不用太长，24小时差不多。 从你的图片上看，不能确定纳米粒子就聚集在细胞膜上，不要纠结纳米粒子吸附在细胞膜上，你用激光共聚焦，只有在一个平面上的光信号才可以进入检测器，实际相当于在细胞中间进行切片，你可以参考下标记细胞膜的染料，这样的染料在激光共聚焦显微镜下，就是细胞膜一圈。 稀释下细胞浓度，在做一次，就可以得到你想要的图片了。 |
4楼2012-02-11 19:32:38
