应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » IEF等电聚焦问题
51/1返回列表
查看: 1896  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

helig

新虫 (初入文坛)

[交流] IEF等电聚焦问题 已有2人参与

最近做一个75KB的蛋白的IEF，用的BIO-RAD的固体水平mini电泳槽，用的GE的低PI范围的Marker，但是跑出来后靠近阳极的两条低PI的marker条带老跑不出来，而且样品跑出来不是一条很窄的带，而是一片比较 模糊的带，因为以前同样的蛋白跑出来等电点是4.6左右，现在却到了5.8左右了，条件基本上没变，就是用了BIO-RAD的支持膜，以前用Amersham的，请问一般什么条件会影响等电聚焦的条带清晰度，而靠近阳极的带老跑不到阳极附近不知道怎么回事？在线等高人指点，谢谢！！（丙烯酰胺交联度：5%T，3%C。聚焦电压：450v 一小时）

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-21 at 13:57 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2009-02-24 21:57:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

helig

新虫 (初入文坛)
上图是今天做的，靠近阴极的PI高的marker跑的还可以，但是靠近阳极的pI低的marker好像都挤到一块了，没有跑开，不知道跟那个条件有关

[ Last edited by helig on 2009-2-25 at 21:39 ]
赞一下 回复此楼
2楼2009-02-25 15:58:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lujun01

银虫 (小有名气)
告诉我你的样品处理过程
有没有尿素?
赞一下 回复此楼
3楼2009-05-19 15:46:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sun1123moon

铜虫 (小有名气)

IEF

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我是做薄层等电聚焦的新手，想请教一下，IEF操作方法是怎么样的？为什么我的电流总是很小，而且跑不出带来？？
希望能指点指点，不然我的实验完全不能进行！！
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-03-15 14:22:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youxuexuan

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by helig at 2009-02-25 15:58:26
上图是今天做的，靠近阴极的PI高的marker跑的还可以，但是靠近阳极的pI低的marker好像都挤到一块了，没有跑开，不知道跟那个条件有关

同问，我是用GE的水平电泳仪，胶是按照15版药典制的，条件是2000V，50mA，1.5h。然后跑完染色发现，marker的条带数目缺少，靠近正极的条带都没有了，自己的样品好的都是酸的，都没有条带染出，只会在上样位置有条带。还有一个是碱性的蛋白，就有条带。
求解释下呗，，
赞一下 回复此楼
5楼2016-06-03 12:21:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 helig 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 123/6150 2026-08-19 23:44 by stan_et
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +13 kkkl_v 2026-08-19 13/650 2026-08-19 22:37 by 宝贝虫子
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +12 基诺咪客 2026-08-17 16/800 2026-08-19 22:04 by kk 的小木虫
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭