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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助：细菌标记的方法
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hhyy

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助：细菌标记的方法

我想把一种细菌做个标记，然后培养后看看这种菌的数量变化情况，请教高手细菌标记的方法都有哪些？谢谢！
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1楼 2012-02-08 10:28:59
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lvxingan1989

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
hhyy(金币+2): ★★★很有帮助 2012-02-08 15:28:27
听过用绿色荧光蛋白去标记细菌，但是要构建质粒，而且对菌种也有要求，也不是什么菌都可以的...你要是只是看看数量变化，直接图个平板不就好了，或者是用分光光度计测一下OD（要是可以的话）...搞的这么深奥干嘛
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实验一般叫人很纠结..
2楼2012-02-08 12:51:50
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zdwxxw

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hhyy(金币+2): ★★★很有帮助 2012-02-09 15:38:46
zhang8826857(金币+2): 鼓励交流 2012-02-09 19:59:43
，标记了菌种再去看数量变化？有点大炮打蚊子的感觉，而且是百分百的空炮。标记一般都是用来研究代谢途径啥的，再说还有一个稳定性的问题，即使你标记了，微生物繁殖一下，后代有没有标记都难说了，怎么计数呀。建议楼主先确认一下自己的最终目的，如果单纯计数，OD足够，最多涂个板
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踏踏实实做好自己，其他的事与你无关。
3楼2012-02-09 09:43:31
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hhyy

铜虫 (小有名气)
谢谢各位的指导，我可能没说清楚，我是想把标记后的菌施入作物的根部，过一段时间再测土壤中这种菌的数量情况。因为土壤中还有很多其他的菌，所以单纯培养不行。
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4楼2012-02-09 15:41:48
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hhyy

铜虫 (小有名气)
再次请教高手，有哪位虫友做过抗生素抗性标记菌株的实验啊，这种标记的方法对菌种有要求吗？和绿色荧光蛋白标记相比有什么差别吗？谢谢了！
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5楼2012-02-14 17:39:55
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wubingqi

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hhyy at 2012-02-09 15:41:48:
谢谢各位的指导，我可能没说清楚，我是想把标记后的菌施入作物的根部，过一段时间再测土壤中这种菌的数量情况。因为土壤中还有很多其他的菌，所以单纯培养不行。

你做植物促生菌？
当然有要求，如果环境中恰好有和你标记后的菌株一样抗性的细菌，就不好区分了啊，不过你可以先取环境样品试试。利福平标记倒是挺常见的。
GFP标记更精确，对菌株一般没有什么要求，关键是制作感受态。现在多采用这种方式吧。
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6楼2012-02-14 19:52:47
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