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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 通过微生物发酵得到一种酶，需要做哪些实验来鉴定是不是新酶？
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kether

新虫 (小有名气)

[求助] 通过微生物发酵得到一种酶，需要做哪些实验来鉴定是不是新酶？

通过微生物发酵得到一种酶，需要做哪些实验来鉴定是不是新酶？
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1楼 2012-01-29 16:57:17
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kether

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 8638600 at 2012-11-14 11:49:44
我也是刚把野生菌里纯出来的酶送去测了N端序列和质谱，blast发现没有同源的，blast出来的结果都不是我这个菌的蛋白，功能也不一样……不知道下面怎么整啊……

你想要得到什么结果呢？如果想确定你纯化出来的酶是不是新酶，可以将纯化出来的酶送到军事医学科学院微生物研究所国家生物医学分析中心做个肽谱鉴定，他们通过搜索数据库，会告诉你是不是新酶。
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15楼2012-11-16 15:09:01
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huangjixiang

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
scelab(金币+3): 基本上是这样的 2012-01-29 18:28:19
如果知道产生菌的种类和是什么类型的酶，用SDSPAGE看下分子量，用一些实验确定下酶学性质，看看和已报道的是否有差别，如果有明显差别基本可以确定是一种新的酶。
如果想进一步确认，就纯化后测末端氨基酸序列，根据氨基酸序列设计引物，把酶基因PCR出来并测序，根据序列分析是否为新的
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kether
2楼2012-01-29 17:15:40
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
唯一的办法是得到氨基酸序列，其它的都是不确定的东西。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

kether
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-01-29 18:45:53
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humanbeeing

木虫 (著名写手)

城市里的农村人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2012-03-07 16:29:11
先要纯化出纯品，然后进行氨基酸残基测序，将测得的序列与数据库中的数据进行比对，判断是不是新酶
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如画如歌如酒如笑如我
4楼2012-01-30 08:57:43
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