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hotmail

木虫 (小有名气)

银虫

[求助] PCR产物经酶切电泳后所得的基因型与测序结果不一致，是何原因？该如何处理？

PCR产物经酶切电泳后所得的基因型与测序结果不一致，是何原因？该如何处理？
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银虫
1楼 2012-01-26 16:22:10
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guojianping

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 分析有条有理，连同上一贴一起授予EPI！ 2012-02-08 21:18:53
懂你意思了，你是说本来是有酶切位点的，现在突变了，位点没有了，是吧。几个问题（1）你是怎么突变的？具体是把酶切位点怎么了？不觉得很奇怪么？1,2泳道加起来就是野生型的大小，你自己用DNAMAN分析下是不是预期的结果？（2）把你的酶切重做一遍，胶照亮一点，看看是不是还有隐藏的条带没照出来？这样的话就能解释测序结果一样的问题了
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11楼2012-01-29 21:26:28
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Charles-glh

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+3): 鼓励交流~ 2012-01-27 05:40:04
电泳后的也要测序啊，为什么看不明白你说的什么意思？你是对比已经测序的序列?
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2楼2012-01-26 21:26:20
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hotmail

木虫 (小有名气)

银虫
引用回帖:
楼: Originally posted by Charles-glh at 2012-01-26 21:26:20:
电泳后的也要测序啊，为什么看不明白你说的什么意思？你是对比已经测序的序列?

酶切产物经电泳后有三种基因型，CC\CT\TT，分别将三种基因型的PCR产物直接测序，测序结果三者都看不出有没有什么不同。
酶切后的产物不需要测序吧？
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银虫
3楼2012-01-27 10:18:30
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hyhl

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2012-01-27 12:57:50
引用回帖:
3楼: Originally posted by hotmail at 2012-01-27 10:18:30:
酶切产物经电泳后有三种基因型，CC\CT\TT，分别将三种基因型的PCR产物直接测序，测序结果三者都看不出有没有什么不同。
酶切后的产物不需要测序吧？

你的实验目的究竟是什么呢？酶切能区分你所说的三种基因型吗？
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4楼2012-01-27 12:36:23
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