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5xiaosh银虫 (小有名气)
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[求助]
菜鸟求助~求大侠帮忙看primer NCBI-blast 的结果
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这对引物怎么样？做rt-pcr，需要构建表达载体的，求大侠帮忙分析一下。第一次用blast。 |
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2楼2012-01-13 18:59:01
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5xiaosh(金币+2): ★★★很有帮助 就这点金币了，谢谢大侠的应助。 2012-01-15 21:59:34
5xiaosh(金币+2): ★★★很有帮助 就这点金币了，谢谢大侠的应助。 2012-01-15 21:59:34
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希望你能这几个方面注意一下， 1、如果做RT-PCR，最好是把自己要选用的酶切位点和保护碱基都加上再去软件里面检测各参数，因为那些碱基加在一起也不少的，约有10个吧，都可以影响到Tm的。 2、两个引物长度不要相差太多，GC含量不要差太大，你这两个的碱基含量快一倍了，这种情况下就可以通过酶切位点和保护碱基来平衡一下了，这点要注意的 3、引物设计的时候有个经验就是末端尽量不用A，虽然也有文章来说明过A无所谓，但是尽量不要去尝试了，出现问题大家都不愿意看到的。 其他自己多做做吧，祝顺利。 |
5楼2012-01-15 12:05:24
海阔天空8158
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