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可蕊

铁虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌发酵过程中的PH变化

我是新人,在发帖前看了看,有关发酵PH问题的帖子,但没有得到我想要的答案,所以从开贴,请大家帮忙
首先,我们的发酵罐是1000L的,在发酵25h后出现菌体大量耗碱,但PH值没有明显变化,氮源补不进去;发酵40h左右PH开始明显下降,直到发酵结束后,PH都是在下降的,溶氧没有出现回升或是下降现象,但OD值不长了
此现象已连续2批出现,但同时发酵的其他罐没有这种现象
谢谢
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大肠杆菌工程菌发酵

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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 可蕊 at 2013-03-11 15:40:16
有的发酵周期是会很长,取决于他的产物。最高时OD600nm可以达到500以上...

大肠达到350以上的我知道的也只有日本一个研究室做到了,不论你是做什么产物,周期长都不是一个好事情,要根据产物表达规律尽量缩短发酵周期。
13楼2013-03-11 19:29:39
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普通回帖

wuyexu1205

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
pH下降是正常的啊,你发酵过程中pH是怎么调的,补碱吗?感觉你发酵放罐的时候还是稳定期的表现,可能在延长一段时间pH与溶氧有可能会回升。氮源补不进去又是什么意思?我是做氮源的,可以私下与我联系,QQ258227115.
满招损,谦受益
2楼2012-01-13 09:21:46
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yfzhang2008

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857(金币+1): 鼓励 2012-01-13 13:54:12
前25h大量耗碱,但氮源补不进去???你用的什么碱,不是氨水吗?怎么说氮源补不进去呢。
发酵40h明显下降,是不是补氨水量需要增大了,所以OD才会不长,如果时间再长点,估计溶氧就要回升了
你发酵周期多长呀,不是构建的工程菌吧?
佛祖对每个人都是公平的
3楼2012-01-13 09:32:05
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wzhenjun

新虫 (初入文坛)

你写的太笼统了,找不到分析的入手点,你是怎么确定大量耗碱的?你的氮源是氨水还是有机氮源?你的培养基里面有没有大量的pH缓冲液?有没有非常容易产酸产碱的物质?
4楼2012-02-01 09:48:21
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暧醉殇

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
发酵过程中pH下降是一个正常现象,但是在后期它的pH值会上升,如果后期pH还是下降则是发酵异常。。。
5楼2012-02-01 10:51:15
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ecolibl21

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先,我们的发酵罐是1000L的,在发酵25h后出现菌体大量耗碱,但PH值没有明显变化,氮源补不进去;
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不明白你所说的耗碱与pH的描述,不知道你们是否是在发酵过程中维持一定的pH。如果自动维持pH的话,pH下降会立刻补碱的,表观看起来你的pH没变化而会开始耗碱。
-------------------------------------------------------------------------------------------------
发酵40h左右PH开始明显下降,直到发酵结束后,PH都是在下降的,溶氧没有出现回升或是下降现象,但OD值不长了,此现象已连续2批出现,但同时发酵的其他罐没有这种现象
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OD不长,我觉得属于补料等工艺原因;pH 在25-40小时内保持稳定,到40小时后下降,是否调节的碱液供应不上?如果LZ提供更多信息,也许更好分析。
PCR发明人穆利斯的成功表明,想象力推动进步
6楼2012-02-01 11:40:35
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
控制好碳源的量是关键
关注我关注的
7楼2012-02-03 20:44:59
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lihao1988903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
诱导以前PH波动应该不是很大,诱导以后PH应该上升的。
8楼2012-02-07 10:18:09
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yellowred255

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
大肠杆菌会产酸是大家都知道的,那为什么PH值下降了您没能联系到这上面呢,酸碱中和肯定是可以的,为什么说补补上碱呢,我认为您在测试时应该是出现了错误,请认真确认一下谢谢
没有过不去的坎,没有走不到的路,加油!
9楼2012-02-10 10:55:06
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的发酵周期也太长了一点吧,不知道你发酵结束的时候A600能达到多少?你所说的情况据我了解一定是培养基碳氮比不合适产生的,通常情况下,氮比例过高发酵过程pH会上升,碳源比例过高发酵过程pH会下降。
另外,大肠是可以利用无机氮的,比如氯化铵,硫酸铵,氨水。
10楼2012-04-20 22:13:02
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