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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量
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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量

蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量具体是多少啊？
来个权威的！！！看了网上好多说法，都不大相同。。。。。纠结的我啊！
要权威的啊！！！咱不差钱。还有母液浓度，工作浓度等等
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好孩子！
1楼 2012-01-09 15:26:57
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zhsDONG

银虫 (小有名气)
LB/Amp/X-gal/IPTG plates:

Autoclave 500 ml LB agar, cool down to approx. 50 C, add under sterile conditions:

2.5 ml ampicillin (20 mg/ml) solution, final concentration: 100 ug/ml;

1 ml X-gal solution [2% (w/v) 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactoside,in dimethylformamide], final concentration 0.004%;

2.5 ml IPTG solution (100 mmol/l isopropyl-beta-D-thiogalactoside), final concentration 0.5 mmol/l.

Pour 25 ml each into a petri dishe and allow to solidify.
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15楼2012-03-17 21:20:27
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+4): Good！ 2012-01-09 17:39:10
zhang8826857(金币+5): ★★★很有帮助 2012-01-10 20:44:51
Amp肯定是100ug/mg,x-gal是2%,每个平板取40uL涂布，IPTG是20%，每个平板取7uL涂布~~~以上是分子克隆里面的说法，其实只要能显色就行，可以自己调整的。我刚做了一次发现显色较浅，可能是显色剂x-gal有问题，多多交流吧~~~
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2楼2012-01-09 16:13:00
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豆豆鱼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+3): ★有帮助 2012-01-10 20:44:58
我们参照宝生物公司的商品目录上的浓度操作，具体的你可以到宝生物官网上查询到的。
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3楼2012-01-09 22:05:05
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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 豆豆鱼 at 2012-01-09 22:05:05:
我们参照宝生物公司的商品目录上的浓度操作，具体的你可以到宝生物官网上查询到的。

我找了找没找到啊，你帮我找下吧，50金币都给你
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好孩子！
4楼2012-01-09 22:18:44
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