24小时热门版块排行榜    

查看: 1496  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

[求助] 从骨髓中分离造血干细胞

小虫想从大鼠股骨的骨髓中分离出造血干细胞(或者有核细胞),进行RT-PCR。但不知道应该怎样分离?愁死我了……希望大家给点建议啊~~谢谢了!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ht_235

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 老实人sdu3375 at 2012-01-08 20:45:39:
我感觉我大鼠的骨髓中有些块状的东西,且较致密……不知道是什么?您看我这样进行操作行否?
1、用生理盐水将骨髓冲到离心管中,进行离心。3000r/min,10min.收集细胞,弃上清。
2、将收集的细胞用约2ml生理盐水 ...

这个转数,不同离心机有所不同,一般是400g的离心力,离心30min。你可以自己换算一下转数
9楼2012-01-10 07:46:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

ht_235

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用Ficoll液,密度梯度离心就可以了。吸取中间的白膜层,就是单个核细胞。如果只要造血干,就需要流式分选CD34细胞了,或者免疫磁珠分选,也是可以的。
2楼2012-01-06 22:41:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ht_235 at 2012-01-06 22:41:05:
用Ficoll液,密度梯度离心就可以了。吸取中间的白膜层,就是单个核细胞。如果只要造血干,就需要流式分选CD34细胞了,或者免疫磁珠分选,也是可以的。

谢谢您~我查资料看到,Ficoll液适用于分离单核细胞啊,不知道可不可以分离单个核细胞?谢谢啦~还有Percoll液是否也可以呢?
3楼2012-01-07 13:06:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ht_235

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
老实人sdu3375(金币+5): 2012-03-10 14:11:09
ficoll分离的是单个核细胞,不是单核细胞。单核细胞也得流式分选CD14或者CD68阳性的才行,哪有那么简单分离单核细胞的方法啊。
ficoll和percoll都是可以的。
4楼2012-01-08 08:47:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +9 Ymlll 2026-03-18 12/600 2026-03-20 00:01 by 23Postgrad
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 10/500 2026-03-19 16:05 by 余麟余
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +17 不知道叫什么! 2026-03-15 19/950 2026-03-19 15:06 by 尽舜尧1
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-19 14:07 by peike
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 346求调剂[0856] +3 WayneLim327 2026-03-16 6/300 2026-03-19 11:21 by WayneLim327
[考研] 0817调剂 +3 没有答案_ 2026-03-14 3/150 2026-03-19 09:51 by Xu de nuo
[教师之家] 焦虑 +9 水冰月月野兔 2026-03-13 13/650 2026-03-19 09:50 by otani
[考研] 材料专硕英一数二306 +5 z1z2z3879 2026-03-18 5/250 2026-03-19 07:43 by BruceLiu320
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 材料专业求调剂 +5 hanamiko 2026-03-18 5/250 2026-03-18 20:19 by 星空星月
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +5 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 6/300 2026-03-18 17:53 by 无际的草原
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见