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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

[求助] 从骨髓中分离造血干细胞

小虫想从大鼠股骨的骨髓中分离出造血干细胞(或者有核细胞),进行RT-PCR。但不知道应该怎样分离?愁死我了……希望大家给点建议啊~~谢谢了!!!
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ht_235

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
老实人sdu3375(金币+5): 2012-03-10 14:11:09
ficoll分离的是单个核细胞,不是单核细胞。单核细胞也得流式分选CD14或者CD68阳性的才行,哪有那么简单分离单核细胞的方法啊。
ficoll和percoll都是可以的。
4楼2012-01-08 08:47:17
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ht_235

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用Ficoll液,密度梯度离心就可以了。吸取中间的白膜层,就是单个核细胞。如果只要造血干,就需要流式分选CD34细胞了,或者免疫磁珠分选,也是可以的。
2楼2012-01-06 22:41:05
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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ht_235 at 2012-01-06 22:41:05:
用Ficoll液,密度梯度离心就可以了。吸取中间的白膜层,就是单个核细胞。如果只要造血干,就需要流式分选CD34细胞了,或者免疫磁珠分选,也是可以的。

谢谢您~我查资料看到,Ficoll液适用于分离单核细胞啊,不知道可不可以分离单个核细胞?谢谢啦~还有Percoll液是否也可以呢?
3楼2012-01-07 13:06:46
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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ht_235 at 2012-01-08 08:47:17:
ficoll分离的是单个核细胞,不是单核细胞。单核细胞也得流式分选CD14或者CD68阳性的才行,哪有那么简单分离单核细胞的方法啊。
ficoll和percoll都是可以的。

是啊~小弟刚上研一,而且做的课题跟自己专业不太相关,没大有头绪~谢谢了~~那么ficoll和percoll这两种细胞分离液得需要哪种密度的呢?您看得从哪儿查呢?谢谢~
5楼2012-01-08 13:23:24
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