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走过无悔

铜虫 (正式写手)

[求助] HPLC堵了,怎么办

HPLC堵了,压力很高,100%甲醇压力达到192bar,之前只是80bar左右。求高人指点该如何办?
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
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padodo(金币+2): 感谢应助! 2012-01-06 08:38:43
是色谱柱堵了吧?用异丙醇低流速冲洗一段时间看看吧。
守候在风中的宁静。
2楼2012-01-05 23:46:27
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zhrmghgmn

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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padodo(金币+3): 感谢应助! 2012-01-06 08:38:50
可能的原因:
1、色谱柱堵塞。
2、连接管路堵塞。
3、样品在流动相中析出。
查找原因,如是色谱柱堵塞,用下列溶剂依次冲洗试试看:
    不含盐的流动相
   甲醇
   乙腈
异丙醇
75%乙腈+25%异丙醇                                                                                          
异丙醇
二氯甲烷
3楼2012-01-06 03:11:31
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c402073239

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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西湖醉鱼(金币+1): 鼓励新人 2012-01-06 19:43:39
我帮助你   
1、先把色谱柱从仪器上取出来,仪器柱温箱里直接接两通,用高纯水冲洗系统,看泵压,如果泵压很低,那说明仪器没有问题(仪器模块没有堵塞);如果泵压很高,那说明仪器模块堵塞了,那你只能从泵、进样器、柱温箱和检测器一个一个检查了,此时你的色谱柱应该没有问题。
2、如果仪器模块没有问题,那色谱柱就很有可能堵塞了,有可能是样品在流动相中析出,导致色谱柱堵塞,先用低浓度的异丙醇和水冲洗(9:1),流速0.5ml/min左右,从色谱柱流出来的液体不要经过检测器,直接流入废液池,再看压力显示,当压力降低时,增加流动相异丙醇的比例,基本上可以搞定了。
相互学习
4楼2012-01-06 09:30:50
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

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如果是色谱柱堵了,有时候低流速反冲效果明显,不过,冲之前先咨询一下。
5楼2012-01-06 10:28:52
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楚王伐齐001

银虫 (小有名气)

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液相色谱有低压区域和高压区域之分。卸掉柱子后,没有压力,说明柱前压力正常。把柱子卸掉,用一根短柱(或只连接保护柱)看压力是否正常。如果正常,说明柱子出问题的可能性较大。如果是反相柱,纯有机相作为流动相时压力正常,一旦有水相加入压力就增大,可能是硅胶被溶解了,也就是柱子基本报废了。如果倒过来冲压力正常,可能是柱子前端筛板或填料出了问题,清洗筛板,也可以把前柱端挖掉少许,在填入同样的填料(有卖,或试用已报废柱子中拆下的)再看压力如何,如仍然不能解决压力问题,说明柱子在实验室无匀浆机及高压填充设备情况下已无法解决,只能报废了。
6楼2012-01-06 11:23:50
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楚王伐齐001

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

液相色谱有低压区域和高压区域之分。卸掉柱子后,没有压力,说明柱前压力正常。把柱子卸掉,用一根短柱(或只连接保护柱)看压力是否正常。如果正常,说明柱子出问题的可能性较大。如果是反相柱,纯有机相作为流动相时压力正常,一旦有水相加入压力就增大,可能是硅胶被溶解了,也就是柱子基本报废了。如果倒过来冲压力正常,可能是柱子前端筛板或填料出了问题,清洗筛板,也可以把前柱端挖掉少许,在填入同样的填料(有卖,或试用已报废柱子中拆下的)再看压力如何,如仍然不能解决压力问题,说明柱子在实验室无匀浆机及高压填充设备情况下已无法解决,只能报废了。
7楼2012-01-06 11:24:09
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yayabanyan

木虫 (小有名气)

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上周我也遇到了这种情况,我是从柱子端慢慢往上排查,后来发现是排空阀里的柱芯被堵了。由于用的是缓冲盐,有机相增加过快导致盐析出,堵塞了柱芯,换一个新的就好了。
8楼2012-01-06 15:50:50
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补天士Sai

金虫 (正式写手)

先换跟柱子看看是不是柱子堵了的问题,要是真是柱子的问题的话,可以反冲、异丙醇洗吧
只要活着,哪里都是天堂!
9楼2012-01-07 07:50:46
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shandaminmin

金虫 (小有名气)

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应现确定是哪儿堵了,短接柱子,是否是柱子堵了。
10楼2012-01-07 12:47:42
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