24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2812  |  回复: 6

杨文心

木虫 (小有名气)

[求助] 急求助几个coupling buffer的配制!!!

1.       0.1M  Tris-Hcl    PH 8.0
2.       0.1 M NaHCO3 pH 8.3 containing 0.5 M NaCl
3.       0.1 M acetic acid/sodium acetate, pH 4.0 containing 0.5 M NaCl
4.       0.1 M Tris-HCl, pH 8.0 containing 0.5 M NaCl.

本人实验中需要用到以上几个coupling buffer,以前没做过生物方面的实验,不知道该如何配制它们,希望各位虫友能够告知准确配制它们的方法(具体的用量和操作方法以及注意事项),感激不尽!
另请教:
        1.见过别的资料上有些讲了其中一些buffer的配制方法,但是浓度或者PH不同,请问可以按照其方法配制好了后再直接稀释相应的倍数然后直接用对应的酸碱调PH吗?
        2.如果可以,那么第2个buffer该用什么调PH呢?能用NaOH溶液吗?该用多大浓度的NaOH调呢?
        3.文献中说后面3个buffer溶液中都containing 0.5 M NaCl ,这是怎么配制的呢?应该不是分别配制两个溶液再混合在一起吧,那么又该如何配制呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+2, 专家考核): 简洁又明了 2012-01-05 08:29:35
杨文心(金币+2): 有帮助 呵呵…谢谢你的回答! 2012-01-09 11:07:51
1、可以
2、用NaCO3溶液调pH
3、containing 0.5 M NaCl是配的时候就加了0.5 M NaCl(定容或者调pH之前)。
2楼2012-01-04 23:04:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sususimple

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(金币+5, 专家考核): 感谢专业的应助!whs 2012-01-05 11:35:27
你可以这样配:
1.先配1MTris-Cl,pH8.0母液,0.2MNaHCO3/NaCO3,pH8.3母液,1 M acetic acid/sodium acetate, pH 4.0母液,5M NaCl母液。
1MTris-Cl,pH8.0母液:用浓HCl调pH直到8.0,定容。
0.2MNaHCO3/NaCO3,pH8.3母液:先分别配好0.2MNaHCO3和0.2M NaCO3,然后两个溶液兑在一起直到pH到8.3.
1 M acetic acid/sodium acetate, pH 4.0母液:先配好1 M acetic acid和1M sodium acetate,然后两个溶液兑在一起直到 pH为4.0。
2.你要配的4种buffer就只需要先算好需要用的母液量,最后再定容就可以了。定容的水最好是超纯水,这样就不会影响pH。
比如配1L的Buffer4:0.1 M Tris-HCl, pH 8.0 containing 0.5 M NaCl:量筒中加入100ml 1MTris-Cl,pH8.0母液,100ml 5M NaCl,加入超纯水至体积到1L即可。
3楼2012-01-05 11:22:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨文心

木虫 (小有名气)

杨文心: 回帖置顶 2012-01-06 10:46:45
引用回帖:
: Originally posted by sususimple at 2012-01-05 11:22:04:
你可以这样配:
1.先配1MTris-Cl,pH8.0母液,0.2MNaHCO3/NaCO3,pH8.3母液,1 M acetic acid/sodium acetate, pH 4.0母液,5M NaCl母液。
1MTris-Cl,pH8.0母液:用浓HCl调pH直到8.0,定容。
0.2MNaHCO3/NaCO3 ...

先谢谢你的回答!然后我再弱弱的问下,对于① ④可以直接配制成0.1M的浓度吗?请教下我若按如下方法配制① ④是否可行:
①   0.1M Tris-HCl  PH 8.0
先称12.11g Tris碱溶于950mL~970mL 无离子水中,边搅拌边滴加浓 HCl,
用pH计测定溶液pH值至所需的pH值,然后再加水补足到1L。
④ 0.1 M Tris-HCl, pH 8.0 containing 0.5 M NaCl
先称12.11g Tris碱溶于950mL~970mL 无离子水中,再加入24.25g NaCl边搅拌边滴加浓 HCl,用pH计测定溶液pH值至所需的pH值,然后再加水补足到1L。
4楼2012-01-06 10:28:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sususimple

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 细心周到哦~ 2012-01-06 18:56:02
杨文心(金币+20): ★★★很有帮助 呵呵…忘了给你金币了,再次感谢你哈! 2012-01-09 11:12:20
引用回帖:
4楼: Originally posted by 杨文心 at 2012-01-06 10:28:09:
先谢谢你的回答!然后我再弱弱的问下,对于① ④可以直接配制成0.1M的浓度吗?请教下我若按如下方法配制① ④是否可行:
①   0.1M Tris-HCl  PH 8.0
先称12.11g Tris碱溶于950mL~970mL 无离子水中,边搅拌边 ...

可以。
你如果只是偶尔用这些Buffer,那直接配成你需要的浓度就可以了,这样也可以省试剂。我之前建议你先配好母液再稀释,是考虑到如果这些Coupling Buffer用的频繁的话,以后配起来方便。
5楼2012-01-06 14:36:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr泡面

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sususimple at 2012-01-06 14:36:44
可以。
你如果只是偶尔用这些Buffer,那直接配成你需要的浓度就可以了,这样也可以省试剂。我之前建议你先配好母液再稀释,是考虑到如果这些Coupling Buffer用的频繁的话,以后配起来方便。...

想问一下50mM Tris-acetate buffer, pH8.5缓冲液是不是可以这样配制:
6.05gTris碱溶于去离子水中,加入乙酸调pH值到8.5,加水补足至1000ml即可?谢谢!
6楼2012-10-26 11:13:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr泡面

金虫 (小有名气)

想请教一下,如果我要配制50mM Tris-acetate buffer, pH8.5缓冲液,是不是可以这样:先称6.05gTris碱溶于900ml去离子水中,再滴加乙酸调pH值到8.5.用水补足至1000ml即可?
7楼2012-10-26 11:16:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 杨文心 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283求调剂 +21 那个噜子 2026-04-09 21/1050 2026-04-10 21:18 by zhouxiaoyu
[考研] 297求调剂 +11 ORCHID1 2026-04-10 12/600 2026-04-10 21:07 by cyh—315
[考研] 一志愿东北大学控制工程085406数二英二385,求调剂 +6 Ezra_Zhang 2026-04-09 6/300 2026-04-10 16:23 by 高维春
[考研] 环境专硕调剂 +16 会说话的肘子 2026-04-06 16/800 2026-04-10 10:30 by asy1wn
[考研] 一志愿中科大070300化学,314分求调剂 +12 wakeluofu 2026-04-09 12/600 2026-04-10 09:57 by liuhuiying09
[考研] 生物与医药调剂 +5 十七sa 2026-04-05 5/250 2026-04-10 08:14 by kangsm
[考研] 268分085602化学工程调剂 +24 月照花林。 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 08:09 by Sammy2
[考研] 269电子信息求调剂,可转专业 +9 独酌wl 2026-04-06 9/450 2026-04-09 20:55 by laoshidan
[考研] 软件工程求调剂22软工296分求调剂,接受跨调 +4 yangchen2017 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:56 by 土木硕士招生
[考研] 270求调剂 +3 031127 2026-04-06 4/200 2026-04-08 21:00 by 逆水乘风
[考研] 285求调剂 +12 AZMK 2026-04-05 18/900 2026-04-08 20:43 by 逆水乘风
[考研] 一志愿华东理工085601材料工程303分求调剂 +15 a1708 2026-04-06 15/750 2026-04-08 16:23 by luoyongfeng
[考研] 求调剂,现在还能填的 +3 上岸小莹加油 2026-04-08 3/150 2026-04-08 14:30 by zhq0425
[考研] 331求调剂 +5 张元一 2026-04-07 6/300 2026-04-07 22:13 by hemengdong
[考研] 材料调剂 +17 小刘同学吖吖 2026-04-06 18/900 2026-04-07 11:41 by 诗与自由
[考研] 生物与医药求调剂 +7 heguanhua 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:41 by macy2011
[考研] 313求调剂 +5 海日海日 2026-04-04 5/250 2026-04-05 15:52 by jndximd
[考研] 358求调剂 +7 秋gk 2026-04-04 7/350 2026-04-05 13:29 by huangmoli
[考研] 材料调剂 +7 dxy调剂 2026-04-04 7/350 2026-04-05 09:15 by 陌秋26
[考研] 调剂 +4 是可乐不是可乐 2026-04-04 4/200 2026-04-04 19:41 by 唐沐儿
信息提示
请填处理意见