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[求助]
急求助几个coupling buffer的配制！！！
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1. 0.1M Tris-Hcl PH 8.0 2. 0.1 M NaHCO3 pH 8.3 containing 0.5 M NaCl 3. 0.1 M acetic acid/sodium acetate, pH 4.0 containing 0.5 M NaCl 4. 0.1 M Tris-HCl, pH 8.0 containing 0.5 M NaCl. 本人实验中需要用到以上几个coupling buffer，以前没做过生物方面的实验，不知道该如何配制它们，希望各位虫友能够告知准确配制它们的方法（具体的用量和操作方法以及注意事项），感激不尽！ 另请教： 1.见过别的资料上有些讲了其中一些buffer的配制方法，但是浓度或者PH不同，请问可以按照其方法配制好了后再直接稀释相应的倍数然后直接用对应的酸碱调PH吗？ 2.如果可以，那么第2个buffer该用什么调PH呢？能用NaOH溶液吗？该用多大浓度的NaOH调呢？ 3.文献中说后面3个buffer溶液中都containing 0.5 M NaCl ，这是怎么配制的呢？应该不是分别配制两个溶液再混合在一起吧，那么又该如何配制呢？ |
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lxj341401
至尊木虫 (著名写手)
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2楼2012-01-04 23:04:18
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+5, 专家考核): 感谢专业的应助！whs 2012-01-05 11:35:27
感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+5, 专家考核): 感谢专业的应助！whs 2012-01-05 11:35:27
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你可以这样配： 1.先配1MTris-Cl，pH8.0母液，0.2MNaHCO3/NaCO3,pH8.3母液，1 M acetic acid/sodium acetate, pH 4.0母液，5M NaCl母液。 1MTris-Cl，pH8.0母液：用浓HCl调pH直到8.0，定容。 0.2MNaHCO3/NaCO3,pH8.3母液：先分别配好0.2MNaHCO3和0.2M NaCO3，然后两个溶液兑在一起直到pH到8.3. 1 M acetic acid/sodium acetate, pH 4.0母液：先配好1 M acetic acid和1M sodium acetate,然后两个溶液兑在一起直到 pH为4.0。 2.你要配的4种buffer就只需要先算好需要用的母液量，最后再定容就可以了。定容的水最好是超纯水，这样就不会影响pH。 比如配1L的Buffer4:0.1 M Tris-HCl, pH 8.0 containing 0.5 M NaCl：量筒中加入100ml 1MTris-Cl，pH8.0母液,100ml 5M NaCl，加入超纯水至体积到1L即可。 |
3楼2012-01-05 11:22:04
杨文心: 回帖置顶 2012-01-06 10:46:45
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先谢谢你的回答！然后我再弱弱的问下，对于① ④可以直接配制成0.1M的浓度吗？请教下我若按如下方法配制① ④是否可行： ① 0.1M Tris-HCl PH 8.0 先称12.11g Tris碱溶于950mL～970mL 无离子水中，边搅拌边滴加浓 HCl， 用pH计测定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水补足到1L。 ④ 0.1 M Tris-HCl, pH 8.0 containing 0.5 M NaCl 先称12.11g Tris碱溶于950mL～970mL 无离子水中，再加入24.25g NaCl边搅拌边滴加浓 HCl，用pH计测定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水补足到1L。 |
4楼2012-01-06 10:28:09
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