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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶标仪上荧光值的最佳范围
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qiu2009

木虫 (正式写手)

[求助] 酶标仪上荧光值的最佳范围

由于实验室没有荧光分光光度，用酶标仪测FAM(5-羧基荧光素）的荧光值，想做一标准曲线。用白色的96孔板，测定出来的数值非常大，几万到十万，请问大侠们，荧光值的范围多少为好呢？
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yinghong155

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1楼2012-01-03 00:39:07
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yidC423R

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
qiu2009(金币+5): 谢谢，那我再试试好了！ 2012-01-05 09:00:11
qiu2009(金币+10): 把多余的金币，发给你了，谢谢回复 2012-01-10 14:34:29
做个标曲，选取线性范围，能不能用不在于你的绝对值大小

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2012-01-04 18:22:14
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丫头7976

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
qiu2009(金币+5): 非常感谢回复，想做一标准曲线的话，请问一般要多大的荧光范围好呢？我调了最低灵敏度，得出几十到几千之间的，不知道这样是否合适。 2012-01-03 12:54:19
qiu2009(金币+10): 把多余的金币，发给你了，谢谢回复 2012-01-10 14:31:57
根据你的样品有关，达到几万很正常啊，灵敏度越高得出的值当然越高了
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3楼2012-01-03 08:46:51
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hanfei19

木虫 (正式写手)
酶标仪上发的是紫外光吧，能进行荧光检测吗，再说这种灵敏度能保证吗
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qiu2009
4楼2012-01-03 18:07:18
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qaz20021

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
qiu2009(金币+5): 谢谢回复，我再多几次了，之前测过几到几千，表曲还可以，R2能达到0.9999,可是老师却说，做得还不够好，试试最佳范围在哪里…… 2012-01-05 08:58:57
qiu2009(金币+10): 把多余的金币，发给你了，谢谢回复 2012-01-10 14:34:10
首先，荧光值不是OD值;其次，不同酶标仪不同检测条件下（参数设置、样品条件等）的线性范围都有较大的差别。最好的办法就是用你的检测物质在相同检测条件下做标准曲线，这样就得到该物质在该条件下的线性范围了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2012-01-04 08:15:06
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