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qiu2009

木虫 (正式写手)

[求助] 酶标仪上荧光值的最佳范围

由于实验室没有荧光分光光度,用酶标仪测FAM(5-羧基荧光素)的荧光值,想做一标准曲线。用白色的96孔板,测定出来的数值非常大,几万到十万,请问大侠们,荧光值的范围多少为好呢?
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yinghong155

铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
请问一下,你做标准曲线的时候,也是用96孔板吗?浓度梯度你是怎么设定的?我也想用多功能酶标仪检测阿霉素的荧光值来定量,求指教啊

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sharing
10楼2014-11-03 16:23:27
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查看全部 13 个回答

丫头7976

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
qiu2009(金币+5): 非常感谢回复,想做一标准曲线的话,请问一般要多大的荧光范围好呢?我调了最低灵敏度,得出几十到几千之间的,不知道这样是否合适。 2012-01-03 12:54:19
qiu2009(金币+10): 把多余的金币,发给你了,谢谢回复 2012-01-10 14:31:57
根据你的样品有关,达到几万很正常啊,灵敏度越高得出的值当然越高了
3楼2012-01-03 08:46:51
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hanfei19

木虫 (正式写手)

酶标仪上发的是紫外光吧,能进行荧光检测吗,再说这种灵敏度能保证吗

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4楼2012-01-03 18:07:18
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qaz20021

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
qiu2009(金币+5): 谢谢回复,我再多几次了,之前测过几到几千,表曲还可以,R2能达到0.9999,可是老师却说,做得还不够好,试试最佳范围在哪里…… 2012-01-05 08:58:57
qiu2009(金币+10): 把多余的金币,发给你了,谢谢回复 2012-01-10 14:34:10
首先,荧光值不是OD值;其次,不同酶标仪不同检测条件下(参数设置、样品条件等)的线性范围都有较大的差别。最好的办法就是用你的检测物质在相同检测条件下做标准曲线,这样就得到该物质在该条件下的线性范围了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2012-01-04 08:15:06
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