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majunyang

银虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化遇到问题

从野生菌里纯化不同蛋白酶组分,发酵液过阴离子柱,穿透峰里检测有酶活,7-56ms/cm电导下也有酶活,流速3ML/min,跑蛋白电泳不能确定是不是同一个组分,又过阳离子柱,还是出现在穿透峰里,洗脱峰居然没有,怎么回事??????谢谢!!
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

我喜欢洗脱20倍柱床体积,洗脱梯度为0-100%,不知道你这个3CV是怎样做的。

同工酶是有可能的
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
17楼2012-01-06 09:28:41
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majunyang

银虫 (初入文坛)

注明下,阴离子和阳离子柱都是用的pH7.4缓冲液
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2楼2011-12-31 10:28:14
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
majunyang: 金币+1, 有帮助 2012-03-22 16:20:54
不知道你的目的蛋白的PH是多少啊,
3楼2011-12-31 16:44:23
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majunyang

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by lihuan0525 at 2011-12-31 16:44:23:
不知道你的目的蛋白的PH是多少啊,

发酵液经硫酸铵沉淀后的沉淀溶于pH7.4缓冲液,不知等电点是多少
.。。。。。。。。。。。
4楼2011-12-31 20:05:17
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