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zcl911ang

银虫 (小有名气)

[求助] 各位用酶抑制剂测活性的大侠,小弟愚钝,求解~!

各位用酶抑制剂测活性的大侠,小弟第一次做酶抑制剂的测定,而且用96孔的酶标仪进行测定,产品是丁酰胆碱酯酶(瓶装),产品的试验说明书,如附件,我想知道的是:
1. 因为取少量的酶就可以测定,目前我手中有60mg(1.2kU)产品,怎么以一种合理 的科学的方法取一到两个U的酶。
2. 取到的酶怎么溶解(说明书说用冰水溶解),[产品激活要Ca2+和Mg2+],大多文献上用磷酸盐稀释,此我急切想要一个确切方案。
3. 小问题,0.05M的磷酸盐怎么配制。做实验过程的注意事项有哪些?
丁酰胆碱酯酶
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  • 2011-12-30 17:01:47, 73.77 K
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  • 2011-12-30 17:02:05, 12.29 K

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zcl911ang

银虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by doufang at 2012-01-06 10:31:20:
0.05M就是配成0.05mon/l的磷酸盐。
再就是酶确实是要溶在冰水中,这个比较好操作。

请问你过有关酶的实验吗?
3楼2012-01-06 15:55:32
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查看全部 10 个回答

doufang

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 谢谢 2012-01-06 13:36:01
zcl911ang(金币+5): 2012-01-06 15:33:45
zcl911ang(金币+5): 2012-01-06 15:56:04
0.05M就是配成0.05mon/l的磷酸盐。
再就是酶确实是要溶在冰水中,这个比较好操作。
fangdd
2楼2012-01-06 10:31:20
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sunnyxue

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
豆哥(金币+1): 谢谢参与交流~~~ 2012-01-08 13:55:21
zcl911ang(金币+8): 2012-01-08 18:43:02
zcl911ang: 金币+7, 有帮助 2012-04-14 08:10:51
我做过关于糖苷酶的实验,确实要加缓冲液,至于冰水,用4摄氏度的水应该就行,就是为了降低酶活性吧,没有底物,应该问题不大。至于2U可以多取点,稀释到2U,低温保存就好。
4楼2012-01-08 09:34:16
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zcl911ang

银虫 (小有名气)

谢谢,我初次做这样的实验,可能还有其相关的问题,还望您能帮忙~!
5楼2012-01-08 18:46:53
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