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suken8009

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:咔唑比色法测定硫酸软骨素遇到问题 已有1人参与

求助,我是新虫,各位大虾,请问有谁做过咔唑比色法测定硫酸软骨素含量的实验吗?现在我遇到了一些问题,在做标准曲线的时候,我的空白参比在加入咔唑溶液后显出了淡淡的绿色,请问这是正常现象吗?但是有几次我的空白参比在加入咔唑溶液后是无色透明的,我怀疑是水的问题,请问这个对实验结果有影响吗?
还有,参照过往文献的方法测定的标曲线性很差,几乎很难成直线,一直不知道是什么问题。
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冰雪灵魂

木虫 (著名写手)

食品科学家族族长

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我最近也在做咔唑硫酸法~空白样也是蓝色的,应该没有什么问题吧,我的线性还可以,我的标样是半乳糖醛酸~
要想得到常人所不能得到的,就懂得付出常人所不能付出的!
2楼2011-12-30 17:12:53
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suken8009

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 冰雪灵魂 at 2011-12-30 17:12:53:
我最近也在做咔唑硫酸法~空白样也是蓝色的,应该没有什么问题吧,我的线性还可以,我的标样是半乳糖醛酸~

哦,我用的是硫酸软骨素标品,空白样有淡淡的绿色,不知道是你标曲是怎么做的,我做的点线性都不好,你是用移液枪移取液体的吗?请问你的枪头是每一管都换还是就是每一管都用一个枪头,这个有影响吗,我现在的标曲一点线性都没有
3楼2011-12-30 21:52:13
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冰雪灵魂

木虫 (著名写手)

食品科学家族族长

【答案】应助回帖

★ ★
树树8013(金币+2): 冰版,新的一年实验顺利,事事顺心。 2012-01-02 13:18:12
我刚开始也是用移液枪,后来发现用枪很不准,我就改成移液管了,线性还可以~标样加完,冰水浴加入硫酸硼砂溶液,沸水浴9min,冷却至室温,加入咔唑无水乙醇溶液,沸水浴15min,冷却至室温,直接侧吸光度值。
要想得到常人所不能得到的,就懂得付出常人所不能付出的!
4楼2011-12-31 10:14:35
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tracyjw

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果所有的样品都是平行测定的,那影响不大,最后计算的时候都减去空白样品的值就可以了。还有,咔唑法的灵敏度很高,所以要求做实验的试管用前一定要洗干净。
5楼2012-04-16 22:03:21
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venna

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 冰雪灵魂 at 2011-12-30 17:12:53
我最近也在做咔唑硫酸法~空白样也是蓝色的,应该没有什么问题吧,我的线性还可以,我的标样是半乳糖醛酸~

楼主你好,小硕最近也为测咔唑比色法测定硫酸软骨素含量犯愁,不知道其原理是什么。因为我的溶液里既有壳聚糖(聚葡萄糖胺(1-4)-2-氨基-B-D葡萄糖)和硫酸软骨素(D-葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖以β-1,4-糖苷键连接而成的重复二糖单位),不知壳聚糖会不会对测定有影响呢???非常非常感激!!!下面的图片是壳聚糖和硫酸软骨素的结构式,以方便楼主查阅哈
求助:咔唑比色法测定硫酸软骨素遇到问题
t01847b94a91985d5d5.png


求助:咔唑比色法测定硫酸软骨素遇到问题-1
t01890882390fff8b66.jpg

不忘初心,方得始终
6楼2014-08-30 19:54:34
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