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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我的pcr产物怎么跟瀑布一样，究竟是为什么
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huichong

铁虫 (初入文坛)

[求助] 我的pcr产物怎么跟瀑布一样，究竟是为什么

大家帮忙看看，我p的是老师原来pcr的产物，大概9kb，我拿这做模板，怎么p出来是这样子的啊，究竟什么原因啊，
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1楼 2011-12-27 00:50:03
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huichong

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by fwks at 2012-01-08 10:02:35:
你要扩增的条带是9kb，延伸时间才6min，有点短啊。建议你把延伸时间改到10min以上试试。
而且扩增这么长的片段，要用到专门的扩增长片段的酶，你用的哪家公司的？有时候如果长片段中GC含量偏高，PCR体系中还需要 ...

用的是fermentas 的dream taq酶和pfu酶。还有是NEB公司的高保真酶。只有NEB这个酶说是能扩20k的，但是我做了做发现NEB的效果最不好。也不知道为什么
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34楼2012-01-08 12:33:22
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heroyl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没图片啊楼主！！
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实验虐我千百遍，我待实验如初恋
2楼2011-12-27 16:43:55
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amylose108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助哦 2012-01-04 08:48:30
我也做过很多这样的PCR,我分析多半是由于引物不好造成的,但如果你能把DNA摸板弄的够纯质量高的话,也可避免
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4楼2011-12-27 21:36:52
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huichong

铁虫 (初入文坛)
西瓜: 回帖置顶 2011-12-28 13:12:32
诶。。。额明明传图了。怎没了？现穿上。。。

左右都是maker
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5楼2011-12-28 01:25:48
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