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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 含量测定
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wqj947891

新虫 (小有名气)

[交流] HPLC 含量测定

HPLC  含量测定   
在254nm的时候，测得目标产物的含量很高有90%多吧；但是换个波长如220nm左右，又出现了一个杂峰，含量就变成只有50多了。按面积百分比算的，我要定量，是不是要选出峰最多的波长？不过这样测得基线不稳。怎么办？
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1楼 2011-12-26 16:52:33
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方书磊

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西湖醉鱼(金币+1): 感谢分享。 2011-12-28 13:20:17
定量时你说的百分比是归一化法，只能做个大致参考。要想定量你应该用外标法或者内标法。因为内标法比较麻烦，所以通常用外标法。
定量时不是要选出峰最多的波长，如果相关文献或药典没有规定检测波长，一般情况是选一个你要测物质特征峰最强的波长。这样你拿标样的特征峰面积跟你自己的样品进行比较就可以得到含量了。
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10楼2011-12-27 14:29:00
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)
★
wqj947891(金币+1):谢谢参与
做紫外，选择最大吸收波长。
做含量，不是做有关物质，杂质峰可以先不管。
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2楼2011-12-26 17:11:06
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huazhzh

木虫 (正式写手)
★
wqj947891(金币+1):谢谢参与
怎么最近看到这么多人喜欢用HPLC定量呢，用紫外很不准的啊，要选择合适的波长，甚至标样什么的，多麻烦。如果杂质数量不是特别的多定量要求又不苛刻的话，做个氢谱看积分也比紫外准多了啊
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3楼2011-12-26 17:58:53
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lantao8823

铁虫 (小有名气)
★
wqj947891(金币+1):谢谢参与
HPLC  面积百分比 定量是不精准的，不如外标法和内标法
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4楼2011-12-26 20:23:45
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