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0620602

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白溶液浓缩后考染结果,我还应注意哪些?

Protocol:
1.将蛋白样品沸水煮3min,混匀后离心,取250μL,加入-20℃预冷的丙酮1mL,-20℃冰箱静置3h。
2.-4℃离心(12000r/min)20min,弃上清(直接倒掉)。
3.200μL丙酮洗涤沉淀2次。
4.室温静置风干25min。
5.加入裂解buffer 20μL,votex,室温静置2min,加入5μL loading buffer,沸水煮3min。
6.12000r/min离心1min,上样,电泳,考染。


protocol还有哪些应该改进的地方?


考染结果
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fishbirdchu

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
风干之后,我们一般做的话用50mMTris-Hci溶解,之后取样加入loading buffer。煮样5min,之后上样。
4楼2012-03-01 13:15:32
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