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hjyxm木虫 (正式写手)
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[求助]
High-Q阴离子层析柱纯化IgG的问题
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各位朋友大家好，最近我在做一个抗体的纯化，使用的柱子是High-Q，但是结果感觉没有达到纯化的效果，做过的能不能分享一点经验呢？谢谢！下面是我的图，1-蛋白Marker, 2-过柱后的IgG, 3-过柱前的IgG; |
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hjyxm
木虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
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- 虫号: 1107889
- 注册: 2010-09-26
- 性别: GG
- 专业: 细胞增殖、生长与分化
2楼2011-12-26 18:46:51
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
hjyxm(金币+2): ★有帮助 谢谢，虽然是百度的，还是感谢！ 2011-12-27 11:09:27
hjyxm(金币+2): ★有帮助 谢谢，虽然是百度的，还是感谢！ 2011-12-27 11:09:27
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离子交换层析法提取IgG 常用的离子交换剂有DEAE纤维素或QAE纤维素，以QAE-Sephadex最为理想，DE22、32、52也可应用。取QAE-SephadexA25或A50经酸处理并在0.05mol/LpH7.5～8.6的磷酸盐缓冲液中平衡，将水分抽干，称湿重Ig加于10ml血清中，在室温30min后，离心或过滤除去离子交换剂。上清液再如此处理一次，即获得较纯的IgG，甚至不含其他杂蛋白。用该技术纯化IgG简便，不损坏抗体，既可小量提取，也可大量制备。 |
3楼2011-12-27 10:23:27