应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 发酵液中蛋白质的提取
121/1返回列表
查看: 3698  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

stone0989

银虫 (初入文坛)

[交流] 发酵液中蛋白质的提取

发酵液离心后取上清液，冷冻干燥浓缩后重新溶于蒸馏水中，进行双向电泳，结果达不到水化过程第一步50V电压，人家解释说是样品太杂，需要去盐处理。不知道有没有遇过这种情况的，怎么解决？除了透析，还有其他去盐方法吗？我看大家有的用0.22微米的超滤管，能起到去盐作用吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-14 16:09:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhouyunbo

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by jialemon at 2012-08-09 21:45:05
你好，我想问下无盐的缓冲液都有什么啊，缓冲液基本上都是有盐的呀？我要用pH4的，乙酸和乙酸钠缓冲体系可以吗...

缓冲体系都是有盐的，乙酸钠也是一种盐。我们所谓的脱盐是指的NaCl或硫酸铵盐，他们含量都是大于200mM。而缓冲体系里的乙酸和乙酸钠浓度一般是小于50mM的，可以不除此盐，此盐非彼盐!
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2012-08-10 09:57:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

gene001

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-12-14 19:58:01
stone0989(金币+1): 2011-12-14 23:09:13
分子筛也可以脱盐的吧，上个简单的凝胶过滤柱！
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-12-14 19:38:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daodao8657

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
stone0989(金币+2): 2011-12-14 23:11:27
用凝胶柱脱盐会让样品有一定程度的稀释，如果对样品浓度有要求或者样品体积较大的话，用凝胶柱反而不方便
用超滤管能起到置换缓冲液脱盐的目的，但是比较适合于样品浓度较低的情况，这种浓缩过重新溶于蒸馏水的情况往往蛋白浓度很高，超滤管不一定好用
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-12-14 21:32:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone0989

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by daodao8657 at 2011-12-14 21:32:01:
用凝胶柱脱盐会让样品有一定程度的稀释，如果对样品浓度有要求或者样品体积较大的话，用凝胶柱反而不方便
用超滤管能起到置换缓冲液脱盐的目的，但是比较适合于样品浓度较低的情况，这种浓缩过重新溶于蒸馏水的情 ...

那可不可以先去盐 再浓缩？发酵液离心后，上清液先过超滤管，在浓缩？
赞一下 回复此楼
4楼2011-12-14 23:11:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daodao8657

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
stone0989(金币+1): 2011-12-15 21:27:40
引用回帖:
4楼: Originally posted by stone0989 at 2011-12-14 23:11:16:
那可不可以先去盐 再浓缩？发酵液离心后，上清液先过超滤管，在浓缩？

可以尝试下，不过超滤管的压力会很大，可能会堵
我们是用millipo的超滤仪，浓缩脱盐可以一步完成
其实可以考虑下先脱盐再冻干浓缩的，这样比较符合一般的实验思路
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-12-15 11:02:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone0989

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by daodao8657 at 2011-12-15 11:02:11:
可以尝试下，不过超滤管的压力会很大，可能会堵
我们是用millipo的超滤仪，浓缩脱盐可以一步完成
其实可以考虑下先脱盐再冻干浓缩的，这样比较符合一般的实验思路

好 谢谢 我试试
回复此楼
7楼2011-12-15 21:28:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
0.22微米的超滤管，能起到去盐作用,但要加入无盐的缓冲液，替换你原来有盐的缓冲液，同时起到浓缩的作用，有利于你后面的冷冻干燥；也可以用分子筛脱盐，但会稀释样品，
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2012-01-11 10:50:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jialemon

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by dasheng1980 at 2012-01-11 10:50:58
0.22微米的超滤管，能起到去盐作用,但要加入无盐的缓冲液，替换你原来有盐的缓冲液，同时起到浓缩的作用，有利于你后面的冷冻干燥；也可以用分子筛脱盐，但会稀释样品，

你好，我想问下无盐的缓冲液都有什么啊，缓冲液基本上都是有盐的呀？我要用pH4的，乙酸和乙酸钠缓冲体系可以吗
赞一下 回复此楼
9楼2012-08-09 21:45:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jialemon

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by zhouyunbo at 2012-08-10 09:57:38
缓冲体系都是有盐的，乙酸钠也是一种盐。我们所谓的脱盐是指的NaCl或硫酸铵盐，他们含量都是大于200mM。而缓冲体系里的乙酸和乙酸钠浓度一般是小于50mM的，可以不除此盐，此盐非彼盐!...

啊，原来是这样啊，我的培养基中的硫酸铵浓度是10g/l 摩尔浓度也就是74mM，浓度不算高吧？发酵上清可以不除盐直接做二维电泳吗？
赞一下 回复此楼
11楼2012-08-11 14:44:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caohuawei

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
您做的是什么产品的发酵？
赞一下 回复此楼
12楼2014-03-03 22:00:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
阳光香味6楼
2011-12-15 11:22   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 stone0989 的主题更新
121/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 16:34 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭