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沸腾鱼

金虫 (正式写手)

[求助] 【求助}请教各位:液相做分离,我下一步该怎么做?

        大家好,我想测定水提取液里面的苦杏仁苷的含量,先用乙腈-0.1%磷酸(10:90)跑,对照品和样品均在17分钟左右出峰,但样品左边16分钟附近有个小峰和17分钟的峰连着;接着用8:92的又跑了一针,样品16、18分钟的两个峰还是没有完全分开,最后又跑了7:93,对照品在33分钟出峰,样品在33分钟没出峰,可能极性变小没冲出来,后面我该怎么办?
    另外我还想同时测定一下水提液中甘草酸的含量,可以怎么做?梯度跑吗?
非常期望大家能给我一点指导,谢谢!金币不多哦!
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-12-13 16:34:51
沸腾鱼(金币+20): 挺好的! 2011-12-14 11:50:02
测的是含量,主要主峰分离度好、重现性高、保留时间适中即可。
1、乙腈比例稍微高一点,譬如15:85。把主峰保留时间调整到5~10min。比较理想。
2、调节流动相pH,主要通过磷酸含量调节。可以调整分离度及保留时间。具体因样品及杂质酸碱性质而定。如样品酸性、而RT杂16min碱性,提高流动相pH,可缩短样品保留时间并且延长RT杂16min保留时间,达到分离目的。主要样品及RT16min杂质酸碱性不一样,或其中一个中性,都可以选择。
3、梯度。15:85——10:90,可以试试。
守候在风中的宁静。
2楼2011-12-13 16:29:30
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沸腾鱼

金虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by 痴夷子皮 at 2011-12-13 16:29:30:
测的是含量,主要主峰分离度好、重现性高、保留时间适中即可。
1、乙腈比例稍微高一点,譬如15:85。把主峰保留时间调整到5~10min。比较理想。
2、调节流动相pH,主要通过磷酸含量调节。可以调整分离度及保留时间 ...

谢谢你啊!
1. 我也试过12:88和15:85的,结果我主峰的右边又多了一个峰,所以才往大极性跑的。
2. 这个调节酸含量不太明白呀!我也不知道杂峰是酸性还是碱性的,那我只能试试了!
最后还是谢谢啊!
3楼2011-12-13 20:42:44
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沸腾鱼

金虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by 痴夷子皮 at 2011-12-13 16:29:30:
测的是含量,主要主峰分离度好、重现性高、保留时间适中即可。
1、乙腈比例稍微高一点,譬如15:85。把主峰保留时间调整到5~10min。比较理想。
2、调节流动相pH,主要通过磷酸含量调节。可以调整分离度及保留时间 ...

还有,怎么把金币给你啊?自动的吗?
4楼2011-12-14 11:44:06
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