24小时热门版块排行榜    

查看: 4127  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

nestzhao

木虫 (小有名气)

[求助] 测序结果发现,在引物位置多了一位碱基,是什么原因引起的?

今天收到测序结果,发现在我的目标片段的引物的位置,多了一位碱基。不知道是什么原因引起的??是测序引起的问题,还是引物本身就有问题??遇到这种情况该怎么处理呢?请各位指教啊!

测序是克隆后去测序的,直接送的是菌液,测序引物用的是通用引物
回复此楼
给力2011
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nestzhao

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by wx1119 at 2011-12-12 19:56:20:
我的测序结果也遇到过,不过没关系的没有影响!

没影响??什么意思??
给力2011
11楼2011-12-12 22:42:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

匿名

用户注销 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
nestzhao(金币+1): 2011-12-11 22:26:02
本帖仅楼主可见
2楼2011-12-11 22:21:57
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

nestzhao

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by mengfei8336 at 2011-12-11 22:21:57:
不明白你的具体意思,如果多出来的碱基是在目的基因外的,那就无妨。你的目的基因多大?有时DNA过长的话在两端会出现一些错误,是正常的。

我这个多出来的碱基是在片段内的,我觉得这个片段大小应该不是问题,我测序是测了多个反应的,然后再拼接的。这个多出来的碱基位于下游引物的位置的中间。测序是双向测通的。
给力2011
3楼2011-12-11 22:25:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panda73

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
nestzhao(金币+3): 2011-12-11 23:12:40
西瓜: 回帖置顶 2011-12-12 17:24:16
西瓜(金币+2): Good!除去引物的问题,PCR本身也有一定的概率会出错,所以克隆时尽量用高保真酶。一般就如panda73所言,多挑几个克隆去测序就好。 2011-12-12 17:29:35
利用PCR进行基因扩增和克隆时,经常出现在引物区的突变,原因主要是引物合成质量不高(缺失或插入),多挑几个阳性克隆进行测序,就好了
4楼2011-12-11 22:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 70/3500 2026-08-16 08:29 by 医学老男孩
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +7 Ldrop2023 2026-08-13 7/350 2026-08-15 15:57 by mzhh2000
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
请填处理意见