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xingxing8713

银虫 (小有名气)

[求助] 谁用过sda I 酶啊

我用此酶切质粒很好,但是切目的片段貌似且不开,每次都挑不到阳性克隆。保护碱基是3个。
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panda73

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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西瓜(金币+3): Good! 2011-12-12 17:04:41
你的PCR产物定量了吗?你的PCR产物多大?一般500-1000bp的PCR产物进行酶切时只要0.3-0.5ug就足够了,因为在DNA进行酶切时,当DNA质量一样时,小片段DNA的分子数多,通常需要加的酶量也多。因而酶切时,要根据DNA分子的大小,以及酶切位点的多少,计算酶切所需的酶量,才能保证载体和PCR的酶切完全
2楼2011-12-11 23:11:29
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