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智慧源泉

银虫 (小有名气)

[求助] 求助培养四膜虫的问题,多谢,急

我的实验需要培养四膜虫,之前发过一个帖子,已经解决了问题,也换了药品。
但是现在又遇到新的问题,四膜虫这段时间一直被感染,长出许多杂菌,搞不清楚什么原因,所以使用的用品全部灭菌过,但是试验结束后还是被感染,百思不得其解,做微生物实验太痛苦了,总是不知道怎么回事就会出问题,我养的这些四膜虫特别娇气。。。没事就闹闹脾气,好烦啊。

我做的是四膜虫的毒性实验,微量热方法,目前做的是硝基苯酚和氨基苯酚与金属对其的联合毒性。苯酚类都是溶解在乙二醇二乙醚里,但是奇怪的是,只要一加如苯酚类溶液,第二天四膜虫就会变浑浊,起初以为是感染了,大幅度灭菌了一下,还是这样。
后来我把苯酚类溶液单独加入培养基内,看看是不是和培养基反应,结果没有变浑浊,很正常,只要一加入四膜虫马上变浑浊,难道是何四膜虫反应了??
再后来我又单独把乙二醇二乙醚加入到四膜虫中,果然变浑浊了,我又试了乙醇和丙酮两种有机溶剂,发现还是会变浑浊,我真是彻底服了。。。也搞不清是什么原因。。。。。到底是怎么回事呢。。。。以前并没有这样过啊。。。。

[ Last edited by zhang8826857 on 2011-12-15 at 13:35 ]
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cheauyn

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流。 2011-12-09 20:32:09
超净台由三相电机作鼓风动力,功率145~260W左右,将空气通过由特制的微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来,形成连续不断的无尘无菌的超净空气层流,即所谓“高效的特殊空气”,它除去了大于0.3μm的尘埃、真菌和细菌孢子等等。超净空气的流速为24~30m/min,这已足够防止附近空气可能袭扰而引起的污染,这样的流速也不会妨碍采用酒精灯或本生灯对器械等的灼烧消毒。工作人员就在这样的无菌条件下操作,保持无菌材料在转移接种过程中不受污染。
    超净台进风口在背面或正面的下方,金属网罩内有一普通泡沫塑料片或无纺布,用以阻拦大颗粒尘埃,应常检查、拆洗,如发现泡沫塑料老化,要及时更换。除进风口以外,如有漏气孔隙,应当堵严,如贴胶布,塞棉花,贴胶水纸等。工作台正面的金属网罩内是超级滤清器,超级滤清器也可更换,如因使用年久,尘粒堵塞,风速减小,不能保证无菌操作时,则可换上新的。
2楼2011-12-09 14:52:06
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gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师

【答案】应助回帖


zhang8826857(金币+1): 有道理 2011-12-09 22:20:50
超净台的空气过滤期是有使用寿命的,还有必须在使用一段时间后拆出来清洗在装回去,不然通入里边的空气很容易带菌的,导致杂菌污染!!!
大家共同交流、共同提高!!!
3楼2011-12-09 18:08:04
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fxgowen

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-12-09 20:32:15
智慧源泉(金币+5): 2011-12-11 20:03:42
我建议你把超净台消下毒。先用75%的酒精喷,然后紫外照射,当然可能还用残留的真菌,然后用甲醛和高锰酸钾按2:1的比例,先放入高锰酸钾,再放入甲醛,每立方米加甲醛80ml,高锰酸钾40g,配好了放一个大敞口器皿放入超净台中,比较味,灭完之后要等一天再用超净台就没问题啦
4楼2011-12-09 20:08:14
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wangsongwei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

建议实验室整体灭菌
5楼2011-12-09 20:45:53
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樱空释-怀

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

智慧源泉(金币+4): 2011-12-11 20:05:26
智慧源泉(金币+4): 2011-12-11 20:05:27
建议试验台用75%酒精擦拭!你文中写“先开紫外,三十分后通风”,应该是边灭菌边通风,灭菌30 min吧!
加油!
6楼2011-12-09 20:53:45
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暧醉殇

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhang8826857(金币+5): good,鼓励新虫 2011-12-09 22:21:01
智慧源泉(金币+5): 2011-12-11 20:07:13
首先超净台的滤网使用的时间是有年限的,经过一段时间的食用滤网是要更换的,但是没有条件的实验室就另当别论了,而且现在大学里的实验室基本上就是能省就省,所以就算要将就也得把滤网清洗干净,然后你用75%的酒精将整个超净台擦拭一遍,如果仍旧不放心可以用双氧水、过氧乙酸等再擦一遍,假如对无菌条件很苛刻的,你不仅要对超净台灭菌,你还要用紫外对你所处的整个环境灭菌,然后在操作之前要把手用75%的酒精擦一遍,再去操作。最后超净台灭菌时要紫外和风一起开的~最后祝你成功!
7楼2011-12-09 21:39:19
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kissyls

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

最好就是彻底消下毒,要是真的更换过滤网,成本还是蛮高的,最直接就是联系厂家,让厂家上门更换,不过比较贵的。
我像只鱼儿在你的荷塘,只为和你守候那皎白月光.游过了四季荷花依然香,等你宛在水中央.
8楼2011-12-09 21:40:08
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣

【答案】应助回帖


zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-12-09 22:21:23
智慧源泉(金币+5): 2011-12-11 20:07:54
智慧源泉(金币+5): 2011-12-11 20:08:51
超净台的空气过滤期是有使用寿命的,另外会因为使用不当或环境不好,又不经常处理,导致它的保护无菌的性能下降;
通风的真正原因是让操作者在无菌的条件下工作,保持持操作环境正压;
先开紫外,三十分后通风,是没问题的,不过日光灯管不能同时开;
把滤器清洁一下,可以做一下验证,确定一下是不是滤器漏了。
dasheng1980
9楼2011-12-09 21:56:05
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jenny静

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhang8826857(金币+3): 鼓励新虫,加油哦 2011-12-10 04:15:54
实验室的卫生也是很重要的,尤其是微生物实验室.......可以考虑实验室整体打扫
10楼2011-12-09 22:13:32
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