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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 2%酸性酪蛋白溶液的配制
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yuten

银虫 (小有名气)

[求助] 2%酸性酪蛋白溶液的配制

因为要测酸性蛋白酶活，所以用了蛋白酶活力测定标准里的方法：称取干酪素 2g，加入 0.1N氢氧化钠 10mL,在水浴中加热使溶解，然后用 pH3.0乳酸-乳酸钠缓冲液定容至 100mL，但是水浴中始终不能完全溶解，而且底部总有絮状沉淀。请问有没有什么方法可以让酪蛋白溶解？
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1楼 2011-12-06 20:57:24
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

yuten(金币+1): 但是加了碱溶解，然后加酸性缓冲液干酪素会呈絮状 2011-12-07 17:52:55
我也配过干酪素的溶液，加热，搅拌各种方法都溶不了，后来发现溶液的ph恰好是干酪素的等电点，加点碱就化了干酪素可以沸水浴加热到一个小时以上，而且调节ph时是要先加碱再加水的
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2楼2011-12-06 22:25:55
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roydxy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

yuten(金币+3): 谢谢 2011-12-08 20:41:41
酪蛋白等电点在4~5之间，用 NaOH或者低pH的盐酸都可以溶解

既然你要用pH3.0的缓冲液溶解，建议你取消第一步用NaOH预溶的过程，直接用3.0溶液来溶解就好，
或者用少量的pH1.0左右的HCl溶解，之后再用少量的NaOH调到3.0也行。

再一条，测定蛋白酶活力时，底物浓度在0.5~1.0%均可，不一定非得调到2%
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3楼2011-12-08 13:07:11
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