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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于PCR无结果的原因
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Icityman

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于PCR无结果的原因

最近跑的PCR一直不是很顺利，采用的体系和程序都是参照师兄师姐的，自己设计了不同梯度的退火温度，但结果还是没有，除了拖尾还是拖尾，怎么改进优化，请各位高手好心人帮忙解决啊！谢谢！！
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1楼 2011-12-06 10:08:29
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Icityman

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 暧醉殇 at 2011-12-06 22:59:23:
首先，先看看你的模板DNA是否降解了。然后，再检查下你所用的PCR反应的东西是否变质了。如果上面两个都没有问题，那么你可以试着降低退火的温度，但是也不能降得太低了。

我这段时间一直在尝试不同的模板和不同的退火温度，哎，就是没结果啊
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16楼2011-12-07 10:06:28
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
Icityman(金币+1): 2011-12-06 10:49:34
1949stone(金币+1): 水一般不会吧 2011-12-06 11:37:55
1.你呢样品没有问题吧，不行换一下
2.看看引物怎么样，是不是不合理还是怎么回事
3.水是不是污染了，换新的看看吧
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2楼2011-12-06 10:18:08
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Icityman

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbwalkman at 2011-12-06 10:18:08:
1.你呢样品没有问题吧，不行换一下
2.看看引物怎么样，是不是不合理还是怎么回事
3.水是不是污染了，换新的看看吧

这个。。样品是师姐给的，引物时我参照codehop自己设计出来的，照讲有拖尾就应该是扩增出来了啊，水污染的可能性比较小吧
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3楼2011-12-06 10:51:03
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xiali-yu

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
1949stone(金币+1): 后一个 估计一般同学不会犯 2011-12-06 11:38:33
Icityman(金币+9): 1 2011-12-07 10:01:02
模板浓度你知道不？如果模板浓度过高，pcr也不会出来产物，还有就是引物前后向浓度是否一致也会对结果有影响，建议用大公司合成隐物

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2011-12-06 10:57:59
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