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跳舞的骆驼

金虫 (初入文坛)

[求助] 基因敲除 已有1人参与

我做了个基因敲除,是将基因中间的一部分100bp左右换成KAN基因,主要过程是通过构建自杀质粒,进行基因重组的方法敲除的。通过pcr验证得到了目的菌株。因为我要敲除的基因在大质粒上, 没有办法将它提取出来,只能通过提取基因组的方法提出来。所以测序没办法进行。现在我做WESTERN 验证发现那个基因还在发挥作用,我不知道是敲除不成功,还是敲除成功了基因继续发挥作用?好难啊!
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梅在在

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你的菌是阴性菌还是阳性菌啊?我也在做敲除,正愁找不到自杀质粒,可否求助一下?
2楼2014-05-16 15:58:10
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