应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白大小
61/1返回列表
查看: 1166  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yanfeier

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白大小

最近在做蛋白纯化，结果蛋白在全菌，上清中大小位置是一直的，但是在纯化完之后，在SDS-PEGA中，纯化完之后酶液的大小和之前的全菌以及上清相比，位置小了一段。求助大家帮忙，谁知道什么原因造成的。急急急
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2011-12-02 11:47:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-12-02 19:50:41
wanhscn(金币+3): the game rule 确实不能代表什么,真正的解决问题的就几个字,我也深有同感! 2011-12-02 22:45:26
可能是降解了。。。。。。。。。。。。。。。。。。。

这些点是为了满足15个字符以上，和答案无关。**** THE Law，借用下海上钢琴师里面的一句台词吧。
赞一下(2人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-12-02 12:45:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanfeier

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by brightfuture01 at 2011-12-02 12:45:59:
可能是降解了。。。。。。。。。。。。。。。。。。。

这些点是为了满足15个字符以上，和答案无关。**** THE Law，借用下海上钢琴师里面的一句台词吧。

请问一下，有什么好的办法可以不让它降解吗？是否可以讲解一下。
赞一下 回复此楼
3楼2011-12-02 15:41:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

allmessup

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
amisking(金币+4): 鼓励发帖交流。 2011-12-02 19:50:51
amisking: 回帖置顶 2011-12-02 19:50:52
yanfeier(金币+10): 5 2011-12-05 11:54:49
引用回帖:
1楼: Originally posted by yanfeier at 2011-12-02 11:47:02:
最近在做蛋白纯化，结果蛋白在全菌，上清中大小位置是一直的，但是在纯化完之后，在SDS-PEGA中，纯化完之后酶液的大小和之前的全菌以及上清相比，位置小了一段。求助大家帮忙，谁知道什么原因造成的。急急急

首先是基础操作的问题——纯化尽量快，尽量在冰上进行~
其次你可以尝试带substrate的纯化，一些底物可能起到稳定比较flexible 的loop的作用；
实在不行你就切胶、digest、打质谱看看哪儿断了，针对性的想办法吧 ~~~~
赞一下(1人) 回复此楼
Ipsascientiapotestasest.
4楼2011-12-02 18:46:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

enoch_lei

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): Good！ whs 2011-12-03 08:48:43
如果是degrade的话，你可以加点protease inhibitor,另外，尽量保持所有buffer在冰里，然后fraction也放在冰里。你可以看看你的胶，看能不能找到molecular weight和接近你的protein的bands，确定是不是degraded了。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-12-03 04:42:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不知道你的酶是不是多聚酶，在SDS-PAGE过程各个亚基解聚，而电泳结果是亚基的条带？
赞一下 回复此楼
6楼2011-12-03 13:08:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yanfeier 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 体制内长辈说体制内绝大部分一辈子在底层，如同你们一样大部分普通教师忙且收入低 +10 瞬息宇宙 2026-02-20 13/650 2026-02-23 11:23 by holypower
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 8rmuugja8q 2026-02-22 7/350 2026-02-23 09:44 by w4l55oybr1
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 khieu8v8m0 2026-02-22 8/400 2026-02-23 09:35 by w4l55oybr1
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 khieu8v8m0 2026-02-22 8/400 2026-02-23 09:29 by w4l55oybr1
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +5 usprnugpzw 2026-02-21 11/550 2026-02-23 09:24 by w4l55oybr1
[教师之家] 为什么中国大学工科教授们水了那么多所谓的顶会顶刊，但还是做不出宇树机器人？ +5 欢乐颂叶蓁 2026-02-21 8/400 2026-02-23 09:19 by 欢乐颂叶蓁
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 khieu8v8m0 2026-02-22 6/300 2026-02-23 07:59 by w4l55oybr1
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +6 3dfhjxgsh7 2026-02-22 9/450 2026-02-23 07:49 by w4l55oybr1
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 khieu8v8m0 2026-02-22 4/200 2026-02-23 06:46 by jsjzfl
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 khieu8v8m0 2026-02-22 5/250 2026-02-23 06:29 by w4l55oybr1
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 khieu8v8m0 2026-02-22 8/400 2026-02-23 06:24 by w4l55oybr1
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +5 3dfhjxgsh7 2026-02-22 6/300 2026-02-23 02:04 by 5jlh3qtdvx
[教师之家] 版面费该交吗 +7 苹果在哪里 2026-02-22 8/400 2026-02-22 22:37 by otani
[基金申请] 面上可以超过30页吧？ +4 阿拉贡aragon 2026-02-22 4/200 2026-02-22 21:22 by 山西悬空寺空悬�
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 3dfhjxgsh7 2026-02-22 4/200 2026-02-22 16:52 by khieu8v8m0
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 usprnugpzw 2026-02-22 3/150 2026-02-22 16:37 by khieu8v8m0
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 usprnugpzw 2026-02-21 4/200 2026-02-22 16:27 by khieu8v8m0
[基金申请] “人文社科而论，许多学术研究还没有达到民国时期的水平” +4 苏东坡二世 2026-02-18 5/250 2026-02-22 16:07 by liangep1573
[基金申请] 什么是人一生最重要的？ +4 瞬息宇宙 2026-02-21 4/200 2026-02-22 11:44 by huagongfeihu
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错，点赞！ +11 瞬息宇宙 2026-02-16 12/600 2026-02-21 21:14 by lq493392203
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭