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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » HPLC柱子堵了怎么办？
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欲飞无界

新虫 (小有名气)

[求助] HPLC柱子堵了怎么办？

今天做HPLC，有一根C18柱堵了，估计是进的样品没有过滤膜，压力线狂飙，哪怕只是连了柱子的一端都飚到报警。（不连柱子的时候是好的）哪位能告诉我该怎么办？？
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1楼 2011-12-01 20:35:27
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

欲飞无界(金币+1): 我确认不是进灰尘，我一直进针，都没事，就是进了一个没过滤的样品之后开始不正常了。进完这个样品以后溶剂峰都没了，全是基线。然后我停机、换乙腈、排气。然后平衡柱子的时候压力就狂飙了 2011-12-02 10:38:12
这种堵法只可能进灰尘之类的东西了，倒冲一段时间试试
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分离、分离
2楼2011-12-01 20:45:41
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herb_fcwr

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
novus(金币+1): 谢谢交流！ 2011-12-02 21:48:21
首先先看这根色谱柱说明，看是否有
这种情况的解决方法，色谱柱是否可以
反冲，如果可以建议反冲，但不要接检测器，
直接流到废液瓶中。
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3楼2011-12-02 11:44:43
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jjwang_88

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
novus(金币+1): 谢谢交流！ 2011-12-02 21:51:27
看你进的样品是什么，如果是盐类就用大量的水相冲小流速冲，时间长些，对应的样品对应的流动相冲，先大流速后小流速。祝你成功~
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成大事不拘小节
4楼2011-12-02 11:58:02
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leecius

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
novus(金币+1): 谢谢交流！ 2011-12-02 21:51:43
估计是柱筛板堵了，有条件的话把柱头重新填装吧。
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心似白云常自在，意如流水任东西。
5楼2011-12-02 12:59:08
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海角孤行

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫_坐地户

【答案】应助回帖

通常倒过来冲一下   也可以用针头捅一下看看能不能吧脏东西搞出来
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当你找不到方向时,就回到原点好好想想.
6楼2011-12-02 14:36:36
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
欲飞无界(金币+1): 2011-12-02 18:39:32
novus(金币+1): 多谢指教！ 2011-12-02 21:52:00
一般程序：
水/乙腈95/5→0/100 or 100%乙腈
→乙腈/异丙醇75/25
→100%异丙醇
→100%二氯甲烷
→100%己烷
pS：
1、若需用到二氯甲烷、己烷，使用反相流动相前需用异丙醇过渡
2、根据污染物性质，选择合适的冲洗溶剂及程序

流速0.5ml/min即可，若冲洗时压力仍然报警，可以尝试在工作站界面调整一下压力上限。

进的样品没有过滤膜，很容易堵的，特别是孔径较小的色谱柱，建议以后使用滤膜，并添加在线过滤器或预柱，以保护色谱柱。
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守候在风中的宁静。
7楼2011-12-02 16:43:07
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pengya1019

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2011-12-02 16:43:07:
一般程序：
水/乙腈95/5→0/100 or 100%乙腈
→乙腈/异丙醇75/25
→100%异丙醇
→100%二氯甲烷
→100%己烷
pS：
1、若需用到二氯甲烷、己烷，使用反相流动相前需用异丙醇过渡
2、根据污染物性质，选择合适 ...

他用的是反相柱，用不着二氯甲烷、己烷来冲柱子吧
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8楼2011-12-02 16:48:10
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主
引用回帖:
8楼: Originally posted by pengya1019 at 2011-12-02 16:48:10:
他用的是反相柱，用不着二氯甲烷、己烷来冲柱子吧

可以！前提是使用前后要用异丙醇过渡。
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守候在风中的宁静。
9楼2011-12-02 16:54:06
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dengyry

金虫 (正式写手)
★
novus(金币+1): 3Q！ 2011-12-02 21:52:41
柱头拧下来，将筛板超声，呵呵，弄过一回。效果不错。
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10楼2011-12-02 20:12:25
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