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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 关于血样处理的问题
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xxdylj_428

木虫 (正式写手)

[交流] 关于血样处理的问题

请问各位，我做某个药的提取回收率考察实验，我取空白血浆200微升，加20微升该药的标准品，200微升2%甲酸乙腈溶液沉淀蛋白，涡旋2min,离心10min.取上清液过膜进样，计算该药的回收率达到90%，请问我血样处理方法是否合理？
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1楼2011-12-01 17:30:10
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jiangfyh

金虫 (小有名气)
★ ★
xxdylj_428(金币+1):谢谢参与
leecius(金币+1): 谢谢帮助。 2011-12-16 08:13:39
200ul过膜？一般沉淀蛋白要血浆体积最少两倍以上！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2011-12-03 08:34:19
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caoxu1988

木虫 (正式写手)
★ ★
xxdylj_428(金币+1):谢谢参与
leecius(金币+1): 谢谢。 2011-12-16 08:13:57
血浆与沉淀蛋白的试剂 1:1，不合适！一般要1:2往上
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3楼2011-12-03 16:04:36
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ruixuefenfei

金虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我想问下你的提取回收率是怎么算出来的？
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4楼2011-12-04 21:10:56
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Amily1002

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
豆哥(金币+1): 谢谢参与交流 2011-12-14 13:04:58
空白血浆取的有点多啊，而且沉淀蛋白要2、3倍才行
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5楼2011-12-14 13:03:15
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haozilai99

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
不合理。感觉你的思路或许不对
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6楼2011-12-14 14:44:01
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liou

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
豆哥(金币+1): 鼓励新虫，欢迎常来药学版~~~ 2011-12-15 08:30:07
我做过用乙腈沉淀蛋白，血浆容易结块，如果是甲醇，就是絮状的沉淀。后者的回收率要高一点。
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7楼2011-12-14 22:42:34
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zhu3183

铁虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
"取空白血浆200微升，加20微升该药的标准品"合适吗？
加入空白血浆的标准品溶液体积在2%以内为好吧？
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8楼2011-12-15 09:26:59
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zhu3183

铁虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
karl2100(金币+1): 谢谢发言！ 2011-12-15 12:45:48
引用回帖:
7楼: Originally posted by liou at 2011-12-14 22:42:34:
我做过用乙腈沉淀蛋白，血浆容易结块，如果是甲醇，就是絮状的沉淀。后者的回收率要高一点。

查文献 发现 有用 ：硫酸锌、乙腈两步沉淀蛋白，离心后，上清液再用溶剂提取，氮气吹干后，在用流动相溶解。
请问，这样做，步骤这么多，回收率能达要求吗。
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9楼2011-12-15 09:30:30
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liou

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
leecius(金币+1): 谢谢！ 2011-12-16 08:14:25
引用回帖:
9楼: Originally posted by zhu3183 at 2011-12-15 09:30:30:
查文献 发现 有用 ：硫酸锌、乙腈两步沉淀蛋白，离心后，上清液再用溶剂提取，氮气吹干后，在用流动相溶解。
请问，这样做，步骤这么多，回收率能达要求吗。

那要看药物的性质来判断了，如果操作规范的情况下，试着多用几种方法来找合适的处理血浆样品，考察哪种方法最合适，提取回收率最好，RSD最小，杂质最少的方法。预实验就是这样啦！
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10楼2011-12-15 21:17:17
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zhu3183

铁虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by Amily1002 at 2011-12-14 13:03:15:
空白血浆取的有点多啊，而且沉淀蛋白要2、3倍才行

有个问题想问一下。我沉淀蛋白后，上清液想用乙酸乙酯萃取。这个乙酸乙酯要求用色谱纯的吗？还是分析纯的就行？
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12楼2011-12-18 22:04:37
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独心独步

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
乙腈体积一般为血浆样品的2-3倍，斡旋离心，吸取上清，氮气吹干，用流动相复溶，再离心，取上清进样。
生物样品不过膜
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13楼2013-03-06 14:14:48
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zhu318311楼
2011-12-15 21:18   回复  
引用回帖:
10楼: Originally posted by liou at 2011-12-15 21:17:17: 那要看药物的性质来判断了，如果操作规范的情况下，试着多用几种方法来找合适的处理血浆样品，考察哪种方法最合适，提取回收率最好，RSD最小，杂质最少的方法。预实验就是这样啦！

恩！
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