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srlee

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4): Good!热心!专业! 2011-11-26 20:36:08
thestormcong(金币+5): 希望能够得到指点。小弟还没有相关经验,谢谢。 2011-11-27 12:09:14
wanhscn(MolEPI+1): 根据楼主反映,理应授予专家指数!补上! 2011-11-27 16:09:01
1)设计验证引物可以在两侧同源臂上,验证时突变株和野生型PCR条带会有区别很容易看出来的!
2)如果你要敲除的目的片段很长大于5kb,那么验证时PCR不是很方面,当然也可以设在你要敲出的目的片段上,如果是正确的突变株理论上是P不出来的,而野生型的能P出来!
3)显然不能依据其他基因的同源序列来设计验证引物的,你可以根据这些同源序列设计一个兼并引物,筛选你的目的基因后再在你的目的基因的基础上walking几个反应不就拿到你要的序列了吗?
祝实验顺利!
3楼2011-11-26 15:15:45
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