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chuanpenglw

新虫 (初入文坛)

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专业: 生物技术药物

[求助] 原生质体制备

大家好，我现在要做真菌原生质体诱变。关于原生质体制备反面有很多不懂得？
请大家帮忙
溶壁酶和蜗牛酶是同一种酶么？买国产酶还是国外的？
要买哪些啊？什么公司有卖？
怎么计算形成率、再生率？
怎么过滤啊？
再生培养基是怎么回事？和普通培养基有啥区别啊？怎么选择再生培养基？
真心求助，本人研一，知识浅薄。
望指教

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1楼 2011-11-24 16:21:41

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修真世界

金虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
zhang8826857(金币+6): 鼓励新虫+热心应助 2011-11-25 22:44:21
chuanpenglw(金币+1): 谢谢你的回复，好高兴有人回复，广东省微生物研究所的溶壁酶，怎么买啊 2011-11-26 11:58:51

如果是做真菌原生质体的话我推荐广东省微生物研究所的溶壁酶，相当好用，37摄氏度水浴摇1-2小时就可得到10的6次方到8次方的原生质体。

再生率就是原生质体涂板后统计平皿上原生质体数目除以制备的原生质体数目。例如，经溶壁酶溶解并过滤洗净的原生质体取20ul到血球计数板观察得到的原生质体数位10的6次方每ml,而涂板加了200ul，最后统计平板上再生出的原生质体为200个
再生率=200除以（10的6次方X0.2ML）

过滤一般用擦显微镜的擦镜纸，4-8层即可

再生培养基又叫高渗培养基就是每升PDA培养基中加入1mol的山梨醇，以增高培养基的渗透压，适合原生质体生长